[发明专利]一种改善烟叶品质的食源性乳酸菌及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种改善烟叶品质的食源性乳酸菌及其制备方法和应用，属于应用微生物技术领域。本发明从酸萝卜中筛选得到一种能在烟叶为唯一营养源的乳酸菌，分类命名为植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）L15，保藏号为CCTCC M 2017459。将L15菌悬液用于烟丝发酵，感官评吸结果表明，发酵后卷烟香气质提升，烟气柔和，杂气、刺激性和苦辣味减弱，酸香味突显，余味改善。发酵后烟丝主要化学成分比例更加协调，致香成分分析表明发酵后烟丝总酸（尤其是乙酸）、总醇和总酯含量增加，总醛（尤其是3‑甲基丁醛）、总酮（尤其是2‑己酮）、总烯、总苯和总呋喃含量减少，提升了卷烟品质。

技术领域

本发明属于应用微生物技术领域，具体涉及一种能改善卷烟品质的食源性植物乳杆菌及其制备方法和应用。

背景技术

烟叶陈化，即烟叶发酵，是在一定温度和湿度条件下，烟叶理化特性发生深刻变化，烟叶香气、色泽和吸味品质明显改善的一个重要卷烟生产加工过程。烟叶陈化分为自然陈化和人工陈化。人工陈化速度快，但发酵后烟叶内各种成分比例不协调，至今已经很少采用。自然陈化发酵效果好，但耗时长，场地占用大、资金积压多，导致生产成本提高。另外，在长期仓储陈化过程中，烟叶易霉变和长虫，给烟草企业造成严重的经济损失。

陈化烟叶表面存在大量微生物群落，这些微生物在生长代谢过程中吸收烟叶的营养物质，同时通过1)向外分泌各种不同酶类，将烟叶表面的大分子物质(蛋白质、纤维素、淀粉等)降解为氨基酸、醇、酯、有机酸等小分子物质，或者2)诱导烟叶表面其他酶系的代谢，最终影响卷烟吸食品质。所以，模拟烟叶陈化过程，将特定微生物单独或混合接种于烟叶，进行发酵，能使烟叶化学成分比例更加协调，烟香和烟气增加，刺激性降低，吸食味改善，烟叶品质显著提升。

目前，用于烟叶发酵的微生物大多分离自烟叶表面或土壤，有些是条件致病菌，存在一定安全隐患。乳酸菌是公认的食品级安全微生物，广泛应用于酸奶、果汁、馒头等食品的风味塑造。另外，乳酸菌通过分泌乳酸、细菌素等代谢产物抑制一些病原细菌和真菌。所以将食源性乳酸菌应用于烟叶发酵，不仅能缩短烟叶发酵时间，提升烟叶质量和吸食品质，更能降低抽吸卷烟造成的不安全性，在卷烟制造行业具有巨大应用潜力。

发明内容

本发明的目的在于提供一种食源性植物乳杆菌及其制备方法。

本发明的第二目的在于提供上述食源性菌株的制备方法。

本发明的另一目的在于提供所述食源性植物乳杆菌在卷烟生产中的应用。

本发明的技术方案如下：所述食源性植物乳杆菌分类命名为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)L15，已于2017年8月28日保藏在中国典型培养物保藏中心；保藏单位地址：中国武汉武汉大学；保藏号为CCTCC M 2017459。

上述食源性植物乳杆菌L15的分离筛选方法为：从湖南怀化采集酸萝卜样品若干份，利用改良MRS固体培养基筛选乳酸菌，单菌落在MRS液体培养基中过夜培养后，保存于-80℃冰箱中，随机选取几株乳酸菌，在烟叶培养基中划线分离，37℃培养48h，筛选分离得到了一株能以烟叶为唯一营养源的植物乳杆菌。

所述的烟叶培养基的配制方法：将品种为K326、具有1年陈化龄、由云南中烟工业有限责任公司原料部提供的烟叶磨成粉末，称取0.7-1.1g粉末和1.8g琼脂，用水调节至100mL，115℃灭菌20min，即得烟叶培养基。