[发明专利]一种改善烟叶品质的食源性乳酸菌及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种基于食源性菌株的烟丝发酵菌剂的制备方法，其特征在于：该菌株分类命名为植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）L15，保藏号为CCTCC M 2017459；按4-8‰接菌量，单位v/v，将在MRS液体培养基中活化14-16h的植物乳杆菌L15接种于MRS液体培养基中，静置培养，离心沉淀菌体，采用无菌去离子水洗涤菌体后，加入无菌去离子水制成浓度为10⁸-10¹⁰ CFU/mL菌悬液，即得到植物乳杆菌L15发酵菌剂。

2.权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述食源性植物乳杆菌的制备方法按以下进行：

从湖南怀化采集酸萝卜样品若干份，利用改良MRS固体培养基筛选乳酸菌，单菌落在MRS液体培养基中过夜培养后，保存于-80℃冰箱中，随机选取几株乳酸菌，在烟叶培养基中划线分离，37℃培养48 h，筛选分离得到了一株能以烟叶为唯一营养源的植物乳杆菌；

所述的烟叶培养基的配制方法：将品种为K326、具有1年陈化龄、由云南中烟工业有限责任公司原料部提供的烟叶磨成粉末，称取0.7-1.1 g粉末和1.8 g琼脂，用水调节至100mL，115℃灭菌20 min，冷却倒平板，备用。

3.权利要求1所述的烟丝发酵菌剂在改善卷烟品质中的应用。

4.权利要求3所述的烟丝发酵菌剂在改善卷烟品质中的应用方法，其特征在于：包括如下步骤：

1）用上述植物乳杆菌L15制备一种发酵制剂，其制备方法为：用植物乳杆菌L15在MRS培养基活化14-16 h，按4-8‰ 单位v/v接种于100 mL MRS液体培养基中，30-37℃静置培养20-24 h，8000-10000 rpm，20-25 min离心沉淀菌体，采用无菌去离子水洗涤2-3次菌体后，加入无菌去离子水制成浓度为10⁸-10¹⁰CFU/mL菌悬液，即植物乳杆菌L15发酵菌剂；

2）称取含水率为10-11%的烟丝20-25 g，喷施5-6 mL菌悬液，装入无菌食品袋中，于恒温恒湿培养箱中发酵7-14天，恒温为28-30℃，恒湿为50-60%湿度，将烟丝制成卷烟，即可。

5.权利要求4所述烟丝发酵菌剂在改善卷烟品质上的应用，其特征在于：所述发酵菌剂浓度为10⁹CFU/mL、发酵温度37℃、菌龄20 h。