[发明专利]一种罗伊式乳杆菌蛋白酶制备含降压肽羊乳活性饮料的方法

说明书

一种罗伊式乳杆菌蛋白酶制备含降压肽羊乳活性饮料的方法，将罗伊式乳杆菌菌泥中加入磷酸缓冲液，离心得上清液即为胞壁蛋白酶的酶液，冷冻干燥获得罗伊式乳杆菌胞壁蛋白酶菌粉；向脱脂后鲜羊奶中加入罗伊式乳杆菌胞壁蛋白酶菌粉和CaCl₂酶解，然后再加β‑环糊精，拐枣多糖、低聚木糖、赤藓糖醇、木糖醇、L‑苹果酸，柠檬酸，柠檬酸钠混合均匀后经均质、杀菌后即得到含降压肽的羊乳活性饮料。本发明以羊乳为原料，GRAS微生物——罗伊式乳杆菌的胞壁蛋白酶为生物催化剂，将羊乳中的蛋白质水解成具有ACE抑制活性的寡肽，制备的降压肽羊乳活性饮料可作为辅助降血压、降血糖和防龋齿食品，具有多重保健功能。

技术领域

本发明涉及一种功能性羊乳饮料的制备方法，特别涉及一种罗伊式乳杆菌蛋白酶制备含降压肽羊乳活性饮料的方法。

背景技术

陕西省是我国传统的奶山羊主产区，关中地区是全国最大的奶山羊良种生产基地。2015年底全省奶山羊存栏180万多只，羊乳产量50万余吨，羊奶粉市场份额达95％以上，奶山羊数量、羊乳产量及羊奶粉产量均为全国第一，但国内羊乳产品的品种少，主要为羊奶粉及液态羊奶，其中大部分羊奶粉作为工业原料销往国外，存在产品科技含量低、附加值不高及同质化严重等问题，国外羊乳产品种类多，主要包括发酵羊乳产品(如奶酪、脱脂酪乳或酸羊奶)、冷冻产品(如冰激凌或冷冻酸羊奶)、液态奶、黄油、功能性羊奶片等。因此，开发羊乳新产品很有必要。

高血压是世界最常见的慢性病，是最大的流行病之一，也是心脑血管病最主要的危险因素。常用降压药物包括钙通道阻滞剂、血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)、血管紧张素受体阻滞剂(ARB)、利尿剂、α受体阻滞剂和β受体阻滞剂六类，其中血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)对于高血压患者具有良好的靶器官保护和心血管终点事件预防作用，且降压作用明确，对糖脂代谢无不良影响，是当今降压类药物中发展最快的一种。常用的ACEI类药物包括卡托普利、依那普利、贝那普利等，但这些合成的ACEI会引起许多不良反应，最常见的是持续性干咳。研究表明，天然来源的ACE抑制肽是蛋白质经酶分解而产生的一类具有ACE抑制活性的多肽类物质，通常含3-10个氨基酸，分子量在300-10000之间，可以快速通过消化粘膜进入血液循环，与ACE强效结合从而抑制其活性，起到降压的作用，因此又叫降压肽。部分益生菌的胞壁蛋白酶能水解乳蛋白释放出肽类，其中的一些短肽具有生物活性，如降血压，但目前还没有降血压的羊乳饮料。

拐枣又叫万寿果，学名枳椇，其多糖具有降血糖的功能，但目前拐枣多糖制备存在纯度低的问题，主要杂质为单糖和双糖，因此去除单双糖和保留多糖是制备高纯度拐枣多糖的关键问题。

发明内容

本发明解决的问题在于提供一种具有降血压功效的罗伊式乳杆菌蛋白酶制备含降压肽羊乳活性饮料的方法。

为达到上述目的，本发明采用的技术方案是：

1)罗伊式乳杆菌增菌培养基制备：

将葡萄糖15-25g、酵母浸粉15-25g、硫酸锰0.02-0.05g、吐温80 0.5-1.0mL，菊糖1.5-2.5g、酪蛋白胨4-6g、磷酸氢二钠4-6g、亮氨酸15-20mg添加到纯净水中，定容至1L，调节pH值至5.5-7.0，于121℃下灭菌得罗伊式乳杆菌增菌培养基；

2)罗伊式乳杆菌培养及菌体收集：

将罗伊式乳杆菌按2％-5％的接种量接入罗伊式乳杆菌增菌培养基中，35-41℃恒温培养18-24h，然后离心倒掉上清液，收集菌体沉淀，之后用无菌生理盐水洗涤后离心得罗伊式乳杆菌菌泥；

3)罗伊式乳杆菌胞壁蛋白酶制备：