[发明专利]一种生物样品中有机酸的检测方法

权利要求书

1.一种生物样品中有机酸的检测方法，其特征在于：包括以下步骤：

1）将晨尿或空腹血液于2200g离心8min，取上清液备用；

2）取步骤1）所得上清液1mL于离心管中，加入100μL内标物，摇匀，再加入100μL质量浓度为2.5%的盐酸羟胺和300μL、10mol/L的氢氧化钠溶液，盖紧，充分混匀后静置1h，再加入130μL质量浓度为50%的硫酸酸化，最后加入2mL质量浓度为10%的硫酸甲醇溶液，漩涡振荡1min后于60℃水浴锅中甲酯化反应90min；

3）反应结束后将其取出，放至室温，然后加入1mL超纯水混匀，再加入2mL氯仿，漩涡振荡2min后于2200g离心8min，取下层溶液；

4）将所得下层溶液经0.45μm微孔有机滤膜过滤后，采用GC-MS进行检测。

2.根据权利要求1所述生物样品中有机酸的检测方法，其特征在于：步骤2）中所述内标物为十七烷酸。

3. 根据权利要求1所述生物样品中有机酸的检测方法，其特征在于：GC-MS检测时的色谱条件为：Hp-5ms色谱柱，30 m×0.25 mm，0.25 μm；进样量：1μL；升温程序：初始40℃保持3min，然后以8℃/min升温至290℃，保持3min；以氦气为载气；流速为1.0mL/min；进样口温度：260℃，传输线：290℃；采用电子轰击离子源质谱检测，其电子能量70 eV；离子源温度230℃；扫描范围：m/z 50-550，扫描方式：全扫描和选择离子扫描，溶剂延迟3.0min。