[发明专利]基于万古霉素修饰的金壳磁性纳米颗粒和纳米标签表面增强拉曼散射检测细菌的方法

权利要求书

1.一种万古霉素修饰的金壳磁性纳米颗粒，其是以粒径100-1000纳米的磁性纳米颗粒为核心，在表面修饰PEI后吸附一层密集均一的金种子，并利用盐酸羟胺还原作用使得吸附的金种子生长至连续的金壳，再将此金壳磁性纳米颗粒为核心通过氨基化反应使表面修饰11-巯基十一烷酸作为连接臂，然后通过酰胺反应连接臂上偶联上一层万古霉素。

2.根据权利要求1所述的万古霉素修饰的金壳磁性纳米颗粒，其特征在于，

所述金壳的厚度为1-90纳米；和/或，

所述11-巯基十一烷酸的浓度范围为0.01-100mM。

3.一种万古霉素修饰的金壳磁性纳米颗粒的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

1)通过溶剂热合成法合成粒径100-1000纳米的Fe₃O₄磁性纳米颗粒，并通过氨基化修饰使Fe₃O₄磁性纳米颗粒带上强正电；

2)使步骤1)制备的氨基化Fe₃O₄磁性纳米颗粒外吸附上一层密集的微小金纳米颗粒，并加入盐酸羟胺作为还原剂，以氯金酸为原料，制备出金壳磁性纳米颗粒；

3)将步骤2)制备的金壳磁性纳米颗粒与11-巯基十一烷酸混合，超声反应，形成羧基化的金壳磁性纳米颗粒；

4)将步骤3)制备的羧基化的金壳磁性纳米颗粒加入到适量2-(N-吗啡啉)乙磺酸缓冲液中，加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和万古霉素，超声反应，即得万古霉素修饰的金壳磁性纳米颗粒。

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，

步骤1)中，Fe₃O₄磁性纳米颗粒的氨基化是将适量Fe₃O₄磁性纳米颗粒加入到适量聚乙烯亚胺溶液中，超声，使得聚乙烯亚胺自主装在Fe₃O₄磁性纳米颗粒表面，从而实现氨基化；和/或，

步骤2)中，所述微小金纳米颗粒的粒径为3-5纳米；和/或，所述盐酸羟胺溶液浓度为0.05-100mg/mL，更优选为0.5mg/mL；和/或，

步骤3)中，所述11-巯基十一烷酸浓度为10-100微摩尔/升，更优选为50微摩尔/升；和/或，

步骤4)中，所述MES缓冲液pH值为5-6，浓度为0.1M；和/或，以g/mL计，所述羧基化的金壳磁性纳米颗粒与所述MES缓冲液的质量体积比为(1:10)-(1:500)，更优选为1:100；和/或，所述EDC和万古霉素使用浓度为1mg/mL。

5.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)通过溶剂热合成法合成粒径100-1000纳米的Fe₃O₄磁性纳米颗粒，并通过氨基化修饰使Fe₃O₄磁性纳米颗粒带上强正电；具体地，Fe₃O₄磁性纳米颗粒的氨基化是将0.1g的Fe₃O₄磁性纳米颗粒加入到100mL聚乙烯亚胺溶液中，超声，使得聚乙烯亚胺自主装在Fe₃O₄磁性纳米颗粒表面，从而实现氨基化；

2)使步骤1)制备的氨基化Fe₃O₄磁性纳米颗粒外吸附上一层密集的微小金纳米颗粒，并加入盐酸羟胺作为还原剂，以氯金酸为原料，制备出金壳磁性纳米颗粒；所述微小金纳米颗粒的粒径为3-5纳米；所述盐酸羟胺溶液浓度为0.5mg/mL；

3)将步骤2)制备的金壳磁性纳米颗粒与11-巯基十一烷酸混合，超声反应，形成羧基化的金壳磁性纳米颗粒；所述11-巯基十一烷酸浓度为10-100微摩尔/升，优选为50微摩尔/升；

4)将步骤3)制备的羧基化的金壳磁性纳米颗粒加入到适量2-(N-吗啡啉)乙磺酸缓冲液中，加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和万古霉素，超声反应，即得万古霉素修饰的金壳磁性纳米颗粒；所述MES缓冲液pH值为5-6，浓度为0.1M；所述羧基化的金壳磁性纳米颗粒与所述MES缓冲液的质量体积比为(1:10)-(1:500)，优选为1:100；所述EDC和万古霉素使用浓度为1mg/mL。