[发明专利]一种具有抑菌活性的底泥微生物

权利要求书

1.一种具有抑菌活性的底泥微生物，其特征在于：所述底泥微生物为Cordyceps cylindrica SKL-1，从所述底泥微生物中提取抑菌活性物质的方法包括以下步骤：种子液培养、扩大发酵培养、提取活性物质，所述提取活性物质的步骤为：在发酵液中加入等体积的乙酸乙酯灭活，将发酵液搅拌后进行抽滤，抽滤2-3次滤除菌体后取滤液；在滤液中加入1.8-2.0倍体积的乙酸乙酯进行萃取，萃取3-4次分离水相和有机相，每次萃取以双频率复合超声波辅助，每次萃取保留上层类黄色澄清液体即有机相，将有机相合并后冷冻干燥即得抑菌活性物质。

2.根据权利要求1所述的一种具有抑菌活性的底泥微生物，其特征在于：所述的双频率复合超声波的频率分别为30-45kHz与60-90kHz，功率密度分别为0.40-0.45W/cm²与0.50-0.60W/cm²。

3.根据权利要求1所述的一种具有抑菌活性的底泥微生物，其特征在于：所述搅拌操作的转速为800-900r/min，搅拌时间为5-15分钟。

4. 根据权利要求1所述的一种具有抑菌活性的底泥微生物，其特征在于：所述的种子液培养步骤为：无菌条件下，取0.5-1.0gCordyceps cylindrica SKL-1冻干菌置于培养皿中，用无菌细管吸取5-10mL培养液置于培养皿，使冻干菌体溶解成悬浮状；活化5-15分钟后将Cordyceps cylindrica KL-1接种入斜面培养基中，在32-35℃条件下恒温培养24-40小时，加入培养基等量的无菌蒸馏水即得种子液。

5.根据权利要求4所述的一种具有抑菌活性的底泥微生物，其特征在于：所述种子液培养步骤中的培养基的组成及其浓度为：马铃薯粉120-140g/L，葡萄糖30-45g/L，琼脂10-12g/L，氯化钠32.0-35.0g/L、硫酸镁3.5-3.8g/L、氯化钙2.5-3.5g/L、碘化钾1.7-2.0g/L、硼酸锌0.040-0.045g/L、硅酸钠0.0022-0.0025g/L、磷酸亚铁0.072-0.080g/L、3-硝基-2,6-二氯吡啶0.0022-0.0025g/L、氨水0.002-0.0022g/L、硝酸锂0.0031-0.0033g/L、余量为无菌蒸馏水；调节pH为7.2-7.4，在121-123℃温度下高压灭菌15-25分钟。

6.根据权利要求1所述的一种具有抑菌活性的底泥微生物，其特征在于：所述扩大发酵培养的步骤为：在发酵培养液中接种入发酵液重量6-8%的种子液，将发酵培养液放置在气浴恒温振荡器中，在发酵温度为22-25℃，摇床转速为200-210r/min的条件下进行发酵扩大培养，发酵培养24-50小时。

7.根据权利要求6所述的一种具有抑菌活性的底泥微生物，其特征在于：所述扩大发酵培养步骤中的发酵培养液的组成及其浓度为：可溶性淀粉13-15g/L，蛋白胨2.0-3.5g/L，抑制剂0.02-0.025g/L，海水素33-35g/L，余量为无菌蒸馏水，调节pH为7.2-7.4，在121-123℃温度下高压灭菌20-30分钟。

8.根据权利要求7所述的一种具有抑菌活性的底泥微生物，其特征在于：所述扩大发酵培养步骤中的抑制剂是重量比为0.32-0.34:1的L-（-）-甘油醛与D-（+）-甘油醛。