[发明专利]一种大鲵肝金属硫蛋白的改性方法

权利要求书

1.一种大鲵肝金属硫蛋白的改性方法，其特征在于，该方法通过以下步骤实现：

步骤1，向脂肪酸中加入三氯化磷，在40-70℃下搅拌反应3-6h，再分液，并对上层液体蒸馏，获得脂肪酸酰氯；所述脂肪酸为月桂树脂酸、豆蔻酸、软脂酸、油酸、亚油酸、亚麻酸中的至少一种；

步骤2，取大鲵肝金属硫蛋白并向其中加入N-甲基吡咯烷酮和三氟乙酸水溶液，搅拌均匀，获得金属硫蛋白液；

步骤3，用氢氧化钠溶液调节所述步骤2获得的金属硫蛋白液的pH值至2-5，超声波分散，获得分散后的金属硫蛋白液；

步骤4，将所述步骤1获得的脂肪酸酰氯加入所述步骤3获得的分散后的金属硫蛋白液中，并搅拌反应4-6h，获得改性后的金属硫蛋白混合液；

步骤5，向所述步骤4获得的改性后的大鲵肝金属硫蛋白混合液中加入有机溶剂，离心、干燥，获得改性后的大鲵肝金属硫蛋白。

2.根据权利要求1所述的一种大鲵肝金属硫蛋白的改性方法，其特征在于，所述步骤2中，所述三氟乙酸水溶液的浓度为0.01-0.05mol/L。

3.根据权利要求2所述的一种大鲵肝金属硫蛋白的改性方法，其特征在于，所述步骤3中，所述氢氧化钠溶液的浓度为0.01-0.05mol/L。

4.根据权利要求3所述的一种大鲵肝金属硫蛋白的改性方法，其特征在于，所述步骤4中，所述搅拌反应的温度为-5-5℃。

5.根据权利要求4所述的一种大鲵肝金属硫蛋白的改性方法，其特征在于，所述步骤5中，所述有机溶剂为丙酮、乙醇中的至少一种。

6.根据权利要求1所述的一种大鲵肝金属硫蛋白的改性方法，其特征在于，所述步骤2中，所述大鲵肝金属硫蛋白的提取方法为：

步骤2.1，采用添加诱导剂的饲料投喂大鲵进行诱导、宰杀，获得大鲵肝脏；

步骤2.2，采用缓冲液对所述步骤2.1获得的大鲵肝脏进行匀浆处理，再离心分离，获得金属硫蛋白提取液；

步骤2.3，采用葡聚糖和亚氨基二乙酸混合物的层析柱对所述步骤2.2获得的金属硫蛋白粗提液层析，获得金属硫蛋白层析液；

步骤2.4，将所述步骤2.3获得的金属硫蛋白层析液进行真空冷冻干燥，获得大鲵肝金属硫蛋白。

7.根据权利要求6所述的一种大鲵肝金属硫蛋白的改性方法，其特征在于，所述步骤2.1中，所述诱导的具体方法为：将诱导剂混合于饲料中，采用所述混有诱导剂的饲料连续投喂大鲵6-12天，每天投喂1-3次。

8.根据权利要求7所述的一种大鲵肝金属硫蛋白的改性方法，其特征在于，所述步骤2.1中，所述诱导剂为乙酸锌、硫酸锌和硫酸铜中的至少一种，所述诱导剂添加的剂量为两栖体重的20-120mg/kg。