[发明专利]水稻抗褐飞虱基因BPH9基因内特异SNP共显性分子标记引物及应用有效
| 申请号: | 201710923716.2 | 申请日: | 2017-09-30 |
| 公开(公告)号: | CN107488731B | 公开(公告)日: | 2020-09-15 |
| 发明(设计)人: | 杨远柱;邓钊;何光存;陈荣智;王凯;秦鹏;符辰建;刘开雨 | 申请(专利权)人: | 湖南隆平高科种业科学研究院有限公司;武汉大学;袁隆平农业高科技股份有限公司 |
| 主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12N15/11 |
| 代理公司: | 长沙星耀专利事务所(普通合伙) 43205 | 代理人: | 宁星耀 |
| 地址: | 410001 湖南省*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 水稻 抗褐飞虱 基因 bph9 特异 snp 显性 分子 标记 引物 应用 | ||
1.一种水稻抗褐飞虱基因BPH9内特异SNP共显性分子标记引物,其特征在于,序列包括:
BPH9-IF:ACCATTGTTAGGCAGTTGTTCA
BPH9-ER:ATTCGACTCCCTTTCTTGTTATCT
BPH9-IR:CAGCCTCCTGAAGAGATCTTTCA
BPH9-EF:AATGTCGCACCCAGCAGC。
2.利用权利要求1所述标记引物的序列对水稻抗褐飞虱基因BPH9的鉴定方法,其特征在于:
对水稻DNA进行PCR扩增:
纯合BPH9基因型扩增出230bp特异性条带和506bp非特异性条带,其余等位基因类型扩增出316bp特异性条带和506bp非特异性条带,杂合基因型扩增出230bp、316bp和506bp条带。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,PCR扩增的具体细节为:PCR体系以10ul记为:1ul 10×PCR反应缓冲液,0.8ul 10mM dNTP,4条引物均为0.15ul 10uM引物,0.1ul TaqDNA聚合酶;2ul DNA模板,双蒸水补足余量;PCR反应条件为:95℃预变性5分钟;95℃变性30秒,58℃退火30秒,72℃延伸45秒,共35个循环;72℃延伸8分钟;扩增产物在2%琼脂糖凝胶中电泳,用凝胶成像仪扫描记录结果。
4.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,选取苗期水稻进行鉴定。
5.权利要求1所述的分子标记引物在水稻抗褐飞虱基因分子育种中的应用。
6.权利要求1所述的分子标记引物在水稻资源筛选鉴定中的应用。
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