[发明专利]CRISPR/CAS9介导药物转运体靶向性敲除的caco‑2细胞模型及其方法在审
| 申请号： | 201710911586.0 | 申请日： | 2017-09-29 |
| 公开（公告）号： | CN107760652A | 公开（公告）日： | 2018-03-06 |
| 发明（设计）人： | 黄黎珍;钟国瑞;谢水林;庞土慧;姜二岗;邹淑香;李浩健;戴仁科 | 申请（专利权）人： | 华南理工大学 |
| 主分类号： | C12N5/10 | 分类号： | C12N5/10;C12N15/85 |
| 代理公司： | 广州粤高专利商标代理有限公司44102 | 代理人： | 何淑珍 |
| 地址： | 510006 广东省*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | crispr cas9 药物 转运 靶向 caco 细胞 模型 及其 方法 | ||
【权利要求书】：
1.CRISPR/CAS9介导药物转运体靶向性敲除caco-2细胞模型的方法，其特征在于，包括如下步骤：
1）对P-gp、BCRP及MRP2转运体设计靶点特异性的sgRNA，设计的sgRNA的序列如序列表中SEQ ID NO：1- SEQ ID NO：6所示，再构建sgRNA表达载体；
2）利用CRISPR/CAS9分别设计P-gp、BCRP及MRP基因单敲除及两两组合双敲除，与hCas9质粒共转染caco-2细胞，进行单克隆化扩大培养，即得转运体基因靶向性的caco-2细胞模型。
2.根据权利要求1所述的CRISPR/CAS9介导药物转运体靶向性敲除caco-2细胞模型的方法，其特征在于，步骤1）中，以U6启动子表达sgRNA，将设计的sgRNA序列合成Oligo，构建sgRNA表达载体。
3.由权利要求1-2任一所述方法得到的caco-2细胞模型。
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