[发明专利]一种以酸性离子液体为催化剂合成圆头蒿多糖衍生物的方法

说明书

本发明公开了一种以酸性离子液体为催化剂合成圆头蒿多糖衍生物及其应用，属生物高分子技术领域。本发明采用酸性离子液体催化亚硒酸，合成圆头蒿硒多糖，产物具有低分子量、高硒含量（10370~20438μg/g）的特点。所用试剂环保、制备简单，无需使用有毒的含硒中间体，反应条件温和、产率高，有效提高了硒含量并缩短了反应所需时间，并显著提高了圆头蒿多糖体外抑制肺癌H1650细胞的能力，拓展了圆头蒿多糖作为天然活性物质的应用范围。

技术领域

本发明属生物高分子技术领域，涉及一种以酸性离子液体为催化剂合成圆头蒿多糖衍生物的方法；本发明同时还涉及硒化圆头蒿多糖体外对抑制H1650肺癌细胞的应用。

背景技术

硒（Selenium）是对人体重要微量营养元素，对硒的化学和生物学研究集中在各类无机硒和有机硒化合物（特别是硒蛋白和硒多糖）结构和功能的发掘。目前，人们很重视多糖经过硒化后活性的增强（或变化），主要集中在体内外免疫调节、抗肿瘤及抗氧化等方面。硒多糖目前报道较多的是化学法制备，亚硒酸钠-硝酸体系（Na₂SeO₃-HNO₃）反应条件温和、易于制备，是目前最受欢迎的多糖硒化试剂。专利CN 106336465 A公开了硒化香菇菌多糖的制备方法和用途，以硝酸/亚硒酸/氯化钡为反应体系，反应8~12小时，得到具有抑制肿瘤细胞的多糖含硒衍生物，硒含量为12 mg/g；专利CN 102718882 B公开了提高当归多糖免疫增强活性的制备方法，以硝酸/亚硒酸为反应体系，反应6~8小时，得到硒含量范围为6.41~12.98 mg/g的当归硒多糖；专利CN 106589154 A公开了野西瓜硒多糖的制备方法，以硝酸水溶液为反应介质，亚硒酸钠为硒化试剂，反应6.5~7.5小时后得到硒含量为5416 .24μg/g的野西瓜硒多糖。

此外，用化学性质活泼的硒化试剂进行多糖的硒化修饰报道较少，主要以含硒酰氯为主。专利CN 105884918 A公开了以二氧六环或甲苯为介质，采用氯氧化硒进行硒多糖的制备，产物硒含量为769~11036 μg/g；专利CN 104072629 A公开了南板蓝根硒化多糖的制备方法及应用，将南板蓝根多糖与乙酸硒醚和氯化亚砜在蒸馏水和DMF中进行反应，产物硒含量为8.9和10.35 mg/g，并具有体外抑制肿瘤细胞的作用。

以上专利和文献中涉及到的多糖硒化修饰技术，均存在各自的缺点：亚硒酸（钠）作为硒化试剂，需要在酸性水溶液中进行反应，这对酯化反应及产物硒多糖的分子量、分子量分布的控制都是不利的；有机法制备硒多糖，含硒中间体制备复杂且毒性大、副反应多，环境不友好。因此，需要开发以酸性离子液体为催化剂合成高效、温和的多糖硒化体系。而酸性离子液体以其热稳定性好、效率高、环境友好且可回收重复利用等优点而广泛应用在各类有机合成反应中。

发明内容

鉴于上述，本发明的目的是提供一种以酸性离子液体为催化剂合成圆头蒿多糖衍生物的方法。

本发明的另一目的在于提供硒化圆头蒿多糖体外对抑制H1650肺癌细胞的应用。

一、硒化圆头蒿多糖的合成

1. 圆头蒿多糖甲酰胺溶液的制备：

将圆头蒿多糖在50℃~70℃、500~800 rpm的转速下搅拌3~6 h溶解于无水甲酰胺中，得圆头蒿多糖的甲酰胺溶液。

上述圆头蒿多糖为酸性杂多糖，单糖组成为L-阿拉伯糖、D-木糖、D-甘露糖、D-葡萄糖和D-半乳糖，其摩尔比为1:3.16:5.86:7.18:3.44，重均分子量为6.963×10⁴ g/mol，总糖含量为89.7%。其中，圆头蒿多糖与无水甲酰胺的质量体积比为2~4 mg/mL。

2. 酸性离子液体的制备