[发明专利]一种检测人及动物血清抗RVF病毒抗体的胶体金免疫层析试纸条

说明书

技术领域

本发明涉及生物检测技术领域，具体是涉及一种检测人及动物血清抗RVF病毒抗体的胶体金免疫层析试纸条。

背景技术

裂谷热是一种急性发热性人畜共患性自然疫源性传染病,主要通过蚊子叮咬在动物间(牛、羊、骆驼、山羊等)流行，也可以由蚊虫叮咬或接触受到感染的动物血液、体液或器官(照顾、宰杀受染动物，摄入生奶等)而传播到人。病原裂谷热病毒(Rift Valley Fever virus，RVF病毒)，为布尼亚病毒科白蛉热病毒属。人感染病毒2-6天后，突然出现流感样疾病表现，发热、头痛、肌肉痛、背痛，一些病人可发展为颈硬、畏光和呕吐，在早期，这类病人可能被误诊为脑膜炎。大多数病例表现相对轻微，少部分病例发展为极为严重疾病，表现为出血热，起病后2-4天，病人出现严重肝病，伴黄疸和出血现象，如呕血、便血、进行性紫癜(皮肤出血引起的皮疹)，牙龈出血。出血病例病死率大约为50％。病毒性出血热可导致动物和人的严重疾病，引起严重的公共卫生问题和因牲畜减少而导致的经济下降问题。对RVF病毒尚无特效药治疗。

裂谷热主要在肯尼亚等非洲地区流行，2000年9月份，裂谷热疫情首次出现在非洲以外地区，在沙特阿拉伯和也门确认本病流行，据世界卫生组织报道：也门报告发病321例，死亡32例，病死率为10％；沙特阿拉伯报告291例中，死亡64例。在原来没有该病的阿拉伯半岛发生了流行，这直接威胁到临近的亚洲及欧洲地区。

RVF病毒感染很容易与血液、消化、呼吸等系统其他疾病相混淆，加上临床医生对其缺乏认知，给该病的诊断和鉴别诊断带来困难。该病毒需要通过实验室手段进行确诊，常用的方法有病毒分离培养、病毒核酸检测和免疫学检测等。病毒分离和免疫学检测或是操作复杂、费时，不能快速得到检测结果，或是检测敏感度不够。

当前，基于PCR技术(常规PCR或荧光定量PCR)对病毒核酸进行检测是对RVF病毒进行早期快速诊断的重要手段。PCR技术具有检测敏感性高，操作简单、快速等优点，然而其前期投入费用较大(对实验室功能分区以及PCR仪的依赖)，而且易受实验室污染而导致假阳性，加上RVF病毒为人兽共患自然疫源性疾病，多发生于非洲、亚洲医疗卫生条件相对较差的地区，所以，亟待建立一种快速、可靠的，适合基层单位和现场应用的RVF病毒检测技术。

发明内容

本发明解决的技术问题是现有的裂谷热病毒检测技术不符合快速、简便、高灵敏度的要求，进而提供一种检测人及动物血清抗RVF病毒抗体的胶体金免疫层析试纸条。

本发明的技术方案是：一种检测人及动物血清抗RVF病毒抗体的胶体金免疫层析试纸条，所述试纸条含有：胶体金标记的特异性RVF病毒重组抗原的玻璃纤维膜、包被有特异性RVF病毒重组抗原的检测线和包被有鼠抗-特异性RVF病毒重组抗原单克隆抗体的质控线的硝酸纤维素膜；待测样本中的抗RVF病毒抗体先与胶体金标记特异性RVF病毒重组抗原反应，然后与硝酸纤维素膜上对应的特异性RVF病毒重组抗原反应，形成特异性RVF病毒重组抗原-特异性RVF病毒抗体-胶体金标记特异性RVF病毒重组抗原夹心复合物，通过胶体金颗粒特有的颜色示踪而判断特异性抗体的有无。

进一步地，所述特异性RVF病毒重组抗原的制备方法为：

(1)分离得到RVF病毒的病毒株，用RNA提取试剂提取出RVF病毒的RNA；

(2)以RVF病毒株的基因组为模板，通过PCR扩增得到N蛋白基因产物；