[发明专利]一种同步检测肉或肉制品中14种动物源性成分的引物组合及其应用有效
申请号: | 201710866115.2 | 申请日: | 2017-09-22 |
公开(公告)号: | CN108330168B | 公开(公告)日: | 2021-08-17 |
发明(设计)人: | 李金春;周彤;李家鹏;许随根;杨君娜;黄鑫;米瑞芳;熊苏玥;乔晓玲 | 申请(专利权)人: | 中国肉类食品综合研究中心 |
主分类号: | C12Q1/6888 | 分类号: | C12Q1/6888;C12Q1/686;C12N15/11 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 王文君;王璐 |
地址: | 100068*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 同步 检测 肉制品 14 动物 成分 引物 组合 及其 应用 | ||
1.鉴别肉或肉制品中动物源性成分的引物组合,其特征在于,含有10对特异性引物对,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1-20所示。
2.鉴别肉或肉制品中动物源性成分的试剂盒或检测试剂,其特征在于,含有权利要求1所述引物组合。
3.权利要求1所述引物组合或权利要求2所述的试剂盒或检测试剂在鉴别肉或肉制品中动物源性成分中的应用,其特征在于,所述动物为猪、牛、绵羊、山羊、鸡、鸭、狗、狐、貉、猫、鼠、驴、鹿和马。
4.一种同步检测肉或肉制品中14种动物源性成分的检测方法,其特征在于,以待测肉或肉制品的DNA为模板,利用权利要求1所述的引物组合,使用PCR和微芯片电泳进行检测,根据电泳图中片段的长度判定结果。
5.如权利要求4所述的方法,其特征在于,将SEQ ID NO.1-10所示的引物置于A反应孔,将SEQ ID NO.11-20所示的引物置于B反应孔,分别进行5重PCR反应,PCR反应体系为:
6.如权利要求4所述的方法,其特征在于,PCR反应条件为:(1)预变性:95℃,3min;(2)变性:95℃,10~15s;退火+延伸:58~62℃,20~45s,30个循环。
7.如权利要求4~6任一所述的方法,其特征在于,每一种特异性扩增产物长度代表一种特定的动物源性成分;
其中,A反应孔:片段长度在78~86bp范围内的为牛源性成分检出;片段长度在130~144bp范围内出现的为驴源性成分检出;片段长度在158~172bp范围内出现的为狗或狐狸或貉源性成分检出;片段长度在176~192bp范围内出现的为鹿源性成分检出;片段长度在195~215范围内出现的为马源性成分检出;
B反应孔:片段长度在79~87bp范围内的为猫源性成分检出;片段长度在114~126bp范围内出现的为猪源性成分检出;片段长度在133~147bp范围内出现的为鼠源性成分检出;片段长度在162~179bp范围内出现的为绵羊或山羊源性成分检出;片段长度在211~233bp范围内出现的为鸡或鸭源性成分检出。
8.权利要求4~7任一所述的方法在肉或肉制品动物源性成分鉴别中的应用,其特征在于,所述动物为猪、牛、绵羊、山羊、鸡、鸭、狗、狐、貉、猫、鼠、驴、鹿和马。
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