[发明专利]一种防治马铃薯枯萎病的菌株及其制剂的制备方法和应用

说明书

本发明涉及一种防治马铃薯枯萎病的菌株及其制剂的制备方法和应用，该菌株为枯草芽孢杆菌MES810，保藏日期为2017年8月10日，保藏编号为CGMCCNo.14514。该菌株对应的制剂的制备方法如下：菌种活化；一级种子液的制备；二级种子液的制备：发酵罐发酵，出料得到枯草芽孢杆菌液体制剂。本发明的枯草芽孢杆菌对茄类镰刀菌、尖孢镰刀菌、串珠镰刀菌、雪腐镰刀菌或接骨木镰刀菌、燕麦镰刀菌组成的镰刀菌属致病菌有强烈的抑制作用，防止马铃薯枯萎病的发生，防治效果达80%以上，促进马铃薯增产、增收。本发明微生物菌剂具有无药害、无残留、不抑制生长以及用量少、施用方法简单的特点，这为施用方案多样化和生态环境的保护提供了可能。

技术领域

本发明属于农业生物领域，涉及一种防治马铃薯枯萎病的菌株及其制剂的制备方法。

背景技术

本发明涉及一种防治马铃薯枯萎病的菌株及其菌剂制备方法，属于利用微生物防治植物土传病害的技术领域。

马铃薯枯萎病是一种毁灭性的土传性真菌病害，一旦大范围发病很难根治，可导致马铃薯减产20%-30%，严重地块可达50%-80%，甚至绝产。我国是世界上种植马铃薯面积最大的国家，且马铃薯是仅次于稻、麦、玉米的四大粮食作物之一，马铃薯枯萎病是近年来对马铃薯造成危害的一种重要真菌性土传病害，该病发病严重时，直接影响马铃薯产量及其经济效益。因此控制马铃薯枯萎病的危害已成为生产上急需解决的问题。

马铃薯枯萎病是一种由茄类镰刀菌（Fusarium solani）、尖孢镰刀菌（F.oxysporum）、串珠镰刀菌（F.moniliforlle）、雪腐镰刀菌（F.nivale）或接骨木镰刀菌（F.sambucinum）、燕麦镰刀菌（F.avenaceum）组成的镰刀菌属致病菌侵染引起的土传病害。病菌复杂，遗传变异性大，抗逆性强，防治难度大。目前采用的防治方法主要有传统方法和施用农药。传统方法如与禾本科作物或绿肥作物等进行轮作，施用有机肥，加强水肥管理等，虽可减轻该病害，但无法彻底根治，应用性差。施用甲霜灵、多菌灵等药剂，施用药剂在短时期内具有一定效果，但是药效不持久，且污染环境，危害生态平衡。

利用微生物防治植物土传病害是最有效的防治措施之一，经检索，目前尚未发现用枯草芽孢杆菌（B.subtilis）防治马铃薯枯萎病的报道。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术中的马铃薯枯萎病防治的不足，提供一种防治马铃薯枯萎病的菌株及其制剂的制备方法。本发明的防治马铃薯枯萎病的菌株枯草芽孢杆菌对茄类镰刀菌（Fusarium solani）、尖孢镰刀菌（F.oxysporum）、串珠镰刀菌（F.moniliforlle）、雪腐镰刀菌（F.nivale）或接骨木镰刀菌（F.sambucinum）、燕麦镰刀菌（F.avenaceum）组成的镰刀菌属致病菌有强烈的抑制作用，防止马铃薯枯萎病的发生，防治效果达80%以上，促进马铃薯增产、增收。

一种防治马铃薯枯萎病的菌株，该菌株为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)MES810，保藏在中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏地址是北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期为2017年8月10日，保藏编号为CGMCCNo.14514。

该枯草芽孢杆菌细胞杆状，革兰氏染色阳性，大小为0.6-0.8μm*2.0-3.5μm,芽孢中生，椭圆形，芽孢囊不膨大。在肉汤培养基上，48h菌落圆形，边缘不整齐，表面干燥，扁平，白色。阳性反应：接触酶；氧化酶；水解淀粉。阴性反应：厌氧生长，卵磷脂酶；丙酸盐利用，乳糖发酵产酸。

采用特异引物进行多重PCR扩增，该菌株产生唯一的扩增产物，条带大小与枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）相同。