[发明专利]一种识别QSG‑7701内Hg2+的咪唑并邻菲啰啉荧光探针及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种能识别QSG-7701细胞内Hg²⁺的2-（4-硝基苯基）咪唑并[5，6-f]邻菲啰啉荧光探针及其制备方法，属于金属离子的荧光探针领域。

背景技术

汞广泛的存在于各类的环境中，是人体非必需的剧毒重金属元素。在自然环境中它微量存在于空气、土壤、水中，但是由于工业化的发展在自然环境中汞与其氧化物逐渐进入了各种环境介质和生物链，在人们的日常生活中与其接触的增多。当汞进入人体后能够在体内蓄积，造成慢性汞中毒，对人体具有非常大的危害。多篇文献报道汞离子进入体内以后会在肝、脑等部位蓄积，造成肝衰竭、脑神经衰竭的症状。QSG-7701细胞是从人正常肝组织提取分离出来的，人体在正常的生活环境内会接触汞及其氧化物在体内蓄积去肝、脑等部位，在人们未发现的情况下对机体缓慢的破坏，其危害较大，多数病例都是在病症出现以后才被发现，其危害甚大，具有潜伏性的特点，如果不及时治疗，会对生命安全产生威胁。因此要及时检测正常人肝细胞QSG-7701细胞中的Hg²⁺，使用高灵敏技术对Hg²⁺进行微量和快速检测，对于能够及早地发现剧毒元素汞在人体内蓄积的情况。

目前常用于检测生物体内Hg²⁺蓄积细胞情况的分析检测方法目前主要是利用Hg²⁺和指示剂(也可称为化学分子探针)之间的特异性化学反应或超分子作用产生的信号变化来对Hg²⁺进行分析检测，这些荧光探针分子对Hg²⁺有高选择性以及较高的灵敏度。因此制备一种荧光探针分子用来检测QSG-7701细胞中的Hg²⁺，使用高灵敏技术对其进行微量和快速检测，对于能够及早地发现以及监测汞在人体肝组织细胞中的蓄积情况显得尤为重要。

本发明提供了一种能够识别QSG-7701细胞内Hg²⁺的荧光探针2-（4-硝基苯基）咪唑并[5，6-f]邻菲啰啉化合物及其制备方法。

发明内容

本发明的目的是一种能识别QSG-7701细胞内Hg²⁺的2-（4-硝基苯基）咪唑并[5，6-f]邻菲啰啉荧光探针及其制备方法。本发明提供的荧光探针对QSG-7701细胞内Hg²⁺的识别结果准确，灵敏度高。

本发明提供的能够识别QSG-7701细胞内Hg²⁺的2-（4-硝基苯基）咪唑并[5，6-f]邻菲啰啉化合物的荧光探针，具有式(I)所示

（I）

本发明还提供了一种能识别QSG-7701细胞内Hg²⁺的2-（4-硝基苯基）咪唑并[5，6-f]邻菲啰啉荧光探针的制备方法。更详细地说是以1,10-菲啰啉为原料，合成出中间体1,10-菲啰啉-5,6-二酮，然后中间体与4-硝基苯甲醛合成2-（4-硝基苯基）咪唑并[5，6-f]邻菲啰啉化合物。

实现本发明的技术方案如下：

反应步骤如下：

（1）将1,10-菲啰啉、二氧化锡、浓硫酸、浓硝酸混合物加热回流后，反应结束后得到粗产物，经重结晶得到纯的化合物（Ⅱ），为黄色固体。

（2）将化合物（Ⅱ）与4-硝基苯甲醛、氯化铵溶于盐酸中加热回流，反应后经柱层析得到化合物（I），为黄色针状晶体。

根据本发明，优选的，步骤（1）所述的1,10-菲啰啉、二氧化锡的的摩尔比为1:3；

根据本发明，优选的，步骤（2）所述的化合物（Ⅱ）1,10-菲罗啉-5,6-二酮、4-硝基苯甲醛的的摩尔比为1:2；

根据本发明，优选的，步骤（1）所述的反应温度为100-140 ℃，更优选为110-130 ℃；

根据本发明，优选的，步骤（2）所述的反应温度为100-120 ℃，更优选为100-110 ℃；

更为详细的，所述的能够识别QSG-7701细胞内Hg²⁺的2-（4-硝基苯基）咪唑并[5，6-f]邻菲啰啉荧光探针的制备方法，步骤如下：