[发明专利]一种识别QSG‑7701内Hg2+的咪唑并邻菲啰啉荧光探针及其制备方法

权利要求书

1.一种能识别QSG-7701细胞内Hg²⁺的2-（4-硝基苯基）咪唑并[5，6-f]邻菲啰啉荧光探针，具有式（I）结构，

式（I）。

2.权利要求1所述的能识别QSG-7701细胞内Hg²⁺的2-(4-硝基苯基）咪唑并[5，6-f]邻菲啰啉荧光探针的制备方法，包括如下步骤：

（1）将1,10-菲啰啉、二氧化锡、浓硫酸、浓硝酸混合物加热回流后，反应结束后得到粗产物，经重结晶得到纯的化合物（Ⅱ），为黄色固体；

（2）将化合物（Ⅱ）与4-硝基苯甲醛、氯化铵溶于盐酸中加热回流，反应后经柱层析得到化合物（I），为黄色针状晶体；

（I）。

3.如权利要求2所述的能识别QSG-7701细胞内Hg²⁺的2-(4-硝基苯基）咪唑并[5，6-f]邻菲啰啉荧光探针的制备方法，其特征在于步骤（1）所述的1,10-菲啰啉与二氧化锡的摩尔比为1:3。

4.如权利要求2所述的能识别QSG-7701细胞内Hg²⁺的2-(4-硝基苯基）咪唑并[5，6-f]邻菲啰啉荧光探针的制备方法，其特征在于步骤（2）所述的化合物（Ⅱ）1,10-菲罗啉-5,6-二酮与4-硝基苯甲醛的摩尔比为1:2。

5.如权利要求2所述的能识别QSG-7701细胞内Hg²⁺的2-(4-硝基苯基）咪唑并[5，6-f]邻菲啰啉荧光探针的制备法，其特征在于步骤（1）所述的加热回流温度为100-140℃，更优选为110-130℃。

6.如权利要求2所述的能识别QSG-7701细胞内Hg²⁺的2-(4-硝基苯基）咪唑并[5，6-f]邻菲啰啉荧光探针的制备方法，其特征在于步骤（2）所述的加热回流温度为100-120℃，更优选为100-110℃。

7.如权利要求2所述的能识别QSG-7701细胞内Hg²⁺的2-(4-硝基苯基）咪唑并[5，6-f]邻菲啰啉荧光探针的制备方法，其特征在于，步骤如下：

（1）称取1,10-菲啰啉3.600 g，二氧化锡4.500 g，于烧瓶中混合均匀，将20 mL浓硫酸，10 mL浓硝酸混合，冰水浴冷却形成冷却的混合酸；沿烧瓶壁缓慢滴加冷却的混合酸，滴加完毕，加热回流，瓶内逐渐生成红棕色气体；停止加热，得到红棕色透明溶液；把红棕色透明溶液倒入至冰水中，用NaOH缓慢中和酸，直到反应混合物的PH=7，此过程生成较多黄色絮状沉淀，抽滤得黄色沉淀，用二氯甲烷萃取三次，合并有机相，水洗两次，合并有机相，有机相旋转蒸干得黄色粉末为化合物（Ⅱ），甲醇重结晶烘干，产率90%；

（2）称取化合物（Ⅱ）1,10-菲啰啉-5,6-二酮0.2100 g，氯化铵0.1060 g，4-硝基苯甲醛0.3020 g，分别加入到圆底烧瓶中，用盐酸溶解，磁力搅拌下油浴加热回流反应；溶液由黄色变为红棕色，冷却至室温，反应液倒入冰水中，再缓慢滴加氨水，中和酸直至PH=7，此过程中有大量淡黄色沉淀产生，抽滤，干燥滤饼至恒重得粗产品，粗产品用硅胶柱层析，得到淡黄色针状晶体为化合物（I），产率60％。

8.具有式（I）结构的化合物，应用于识别QSG-7701细胞内Hg²⁺的荧光探针

式（I）。