[发明专利]一种真核启动子及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种真核启动子，其特征在于，所述真核启动子为3种具有不同转录活性的突变CMV启动子中的任意一种，3种启动子分别命名为mCMV₁、mCMV₅、mCMV₁₀，其碱基序列分别如SEQID NO.1、SEQ ID NO.5、SEQ ID NO.10所示。

2.根据权利要求1所述的真核启动子，其特征在于，所述启动子为基于人野生型CMV启动子改造获得的具有不同转录活性的突变CMV启动子。

3.根据权利要求1或2所述的真核启动子，其特征在于，所述启动子mCMV₁、mCMV₅和mCMV₁₀为高转录活性真核启动子。

4.一种权利要求1所述真核启动子的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：将人野生型CMV启动子中的NF-κB结合位点以不同的组合方式替换人工碱基序列，以此获得具有不同转录活性的突变CMV启动子mCMV₁、mCMV₅、mCMV₁₀。

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述mCMV₁用BS-T替代人野生型CMV启动子中的wtBS1，用BS-P替代人野生型CMV启动子中的wtBS2，所述BS-T碱基序列为GGGGTTTCCC，所述wtBS1碱基序列为GGGACTTTCC，所述BS-P碱基序列为GGGGATTCCC，所述wtBS2碱基序列为GGGACTTTCC。

6.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述mCMV₅用BS-T替代人野生型CMV启动子中的wtBS1，所述BS-T碱基序列为GGGGTTTCCC, 所述wtBS1碱基序列为GGGACTTTCC。

7.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述mCMV₁₀用BS-P替代人野生型CMV启动子中的wtBS2，所述BS-P碱基序列为GGGGATTCCC,所述wtBS2碱基序列为GGGACTTTCC。

8.一种权利要求1所述真核启动子在控制合成生物学中的基因表达输出量中的应用。