[发明专利]一种编码甘薯花青素还原酶的IbANR基因及其应用在审

专利信息
申请号: 201710849399.4 申请日: 2017-09-20
公开(公告)号: CN107686841A 公开(公告)日: 2018-02-13
发明(设计)人: 王爱民;高霞莉;李仁赛;侯梦颖;任磊;马代夫 申请(专利权)人: 江苏师范大学
主分类号: C12N15/53 分类号: C12N15/53;C12N9/02;C12N15/10;A01H5/00
代理公司: 徐州市三联专利事务所32220 代理人: 周爱芳
地址: 221000 江*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 一种 编码 甘薯 花青素 还原酶 ibanr 基因 及其 应用
【权利要求书】:

1.一种编码甘薯花青素还原酶的IbANR基因,其特征在于,其具有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列,所述IbANR基因具有负责调控花青素合成的功能。

2.一种权利要求1所述IbANR基因编码的蛋白质,其特征在于,具有SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列。

3.一种含有权利要求1所述IbANR基因在甘薯栽培品种徐紫薯3号植株中的应用,其特征在于,具体包括以下步骤:

分别取徐紫薯3号的新鲜的叶片、茎、膨大根和成熟根,每3株为一组混样,液氮速冻后存于-80℃冰箱,提取RNA并反转成cDNA,采用荧光定量试剂盒,反应在定量PCR仪上进行;

其中,甘薯β-actin基因作为反应中的内参;

β-actin引物序列:F:TGTTGCTATTCAGGCTGTGC;

R:AAACGAAGAATGGCATGAGG;

IbANR定量PCR引物:F:GACCTGAGCGACAAGTGGTT;

R:TTTGGCTTGGGTGGTTAGAG。

4.一种含有权利要求1所述IbANR基因在甘薯品种块根中的应用,其特征在于,具体包括以下步骤:

分别取成熟期的大小适中健康薯块,每3个一组,切成0.5×0.5cm的小丁混样,液氮速冻后存于-80℃冰箱,提取RNA并反转成cDNA,采用荧光定量试剂盒,反应在定量PCR仪上进行;

其中,甘薯β-actin基因作为反应中的内参;

β-actin引物序列:F:TGTTGCTATTCAGGCTGTGC;

R:AAACGAAGAATGGCATGAGG;

IbANR定量PCR引物:F:GACCTGAGCGACAAGTGGTT;

R:TTTGGCTTGGGTGGTTAGAG。

5.根据权利要求4所述IbANR基因在甘薯品种块根中的应用,其特征在于,选用的甘薯品种为徐薯28号、徐薯32号、徐渝34号、徐紫薯1号和徐紫薯3号。

6.一种权利要求1所述IbANR基因的获得方法,其特征在于,具体包括以下步骤:

根据甘薯转录组测序结果,获得comp111253_c0共747个碱基的核苷酸序列,通过BLASTn在线比对与其他植物ANR基因同源性高达90%以上,以该段核苷酸序列为核心序列,将3’、5’RACE测序结果与核心序列拼接获得cDNA全长序列。

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