[发明专利]一种编码甘薯花青素还原酶的IbANR基因及其应用在审
申请号: | 201710849399.4 | 申请日: | 2017-09-20 |
公开(公告)号: | CN107686841A | 公开(公告)日: | 2018-02-13 |
发明(设计)人: | 王爱民;高霞莉;李仁赛;侯梦颖;任磊;马代夫 | 申请(专利权)人: | 江苏师范大学 |
主分类号: | C12N15/53 | 分类号: | C12N15/53;C12N9/02;C12N15/10;A01H5/00 |
代理公司: | 徐州市三联专利事务所32220 | 代理人: | 周爱芳 |
地址: | 221000 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 编码 甘薯 花青素 还原酶 ibanr 基因 及其 应用 | ||
1.一种编码甘薯花青素还原酶的IbANR基因,其特征在于,其具有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列,所述IbANR基因具有负责调控花青素合成的功能。
2.一种权利要求1所述IbANR基因编码的蛋白质,其特征在于,具有SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列。
3.一种含有权利要求1所述IbANR基因在甘薯栽培品种徐紫薯3号植株中的应用,其特征在于,具体包括以下步骤:
分别取徐紫薯3号的新鲜的叶片、茎、膨大根和成熟根,每3株为一组混样,液氮速冻后存于-80℃冰箱,提取RNA并反转成cDNA,采用荧光定量试剂盒,反应在定量PCR仪上进行;
其中,甘薯β-actin基因作为反应中的内参;
β-actin引物序列:F:TGTTGCTATTCAGGCTGTGC;
R:AAACGAAGAATGGCATGAGG;
IbANR定量PCR引物:F:GACCTGAGCGACAAGTGGTT;
R:TTTGGCTTGGGTGGTTAGAG。
4.一种含有权利要求1所述IbANR基因在甘薯品种块根中的应用,其特征在于,具体包括以下步骤:
分别取成熟期的大小适中健康薯块,每3个一组,切成0.5×0.5cm的小丁混样,液氮速冻后存于-80℃冰箱,提取RNA并反转成cDNA,采用荧光定量试剂盒,反应在定量PCR仪上进行;
其中,甘薯β-actin基因作为反应中的内参;
β-actin引物序列:F:TGTTGCTATTCAGGCTGTGC;
R:AAACGAAGAATGGCATGAGG;
IbANR定量PCR引物:F:GACCTGAGCGACAAGTGGTT;
R:TTTGGCTTGGGTGGTTAGAG。
5.根据权利要求4所述IbANR基因在甘薯品种块根中的应用,其特征在于,选用的甘薯品种为徐薯28号、徐薯32号、徐渝34号、徐紫薯1号和徐紫薯3号。
6.一种权利要求1所述IbANR基因的获得方法,其特征在于,具体包括以下步骤:
根据甘薯转录组测序结果,获得comp111253_c0共747个碱基的核苷酸序列,通过BLASTn在线比对与其他植物ANR基因同源性高达90%以上,以该段核苷酸序列为核心序列,将3’、5’RACE测序结果与核心序列拼接获得cDNA全长序列。
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