[发明专利]一种检测分泌型报告蛋白含量的优化方法及其所用生物材料

权利要求书

1.检测分泌型报告蛋白含量的方法，包括：

1）提供DNA分子，所述DNA分子表达由分泌型报告蛋白和标签蛋白连接而成的融合蛋白；

2）将所述DNA分子导入生物细胞，得到含有所述DNA分子的重组生物细胞，用培养基培养所述重组生物细胞，使所述融合蛋白表达，用结合针对所述标签蛋白的抗体的免疫磁珠从所述培养基中收集融合蛋白，得到融合蛋白-免疫磁珠复合物；

3）将所述融合蛋白-免疫磁珠复合物在含有所述分泌型报告蛋白的底物的液体中检测所述分泌型报告蛋白的信号，根据所述信号确定所述分泌型报告蛋白的含量；所述分泌型报告蛋白为分泌型荧光素酶；

所述标签蛋白为Flag标签蛋白；

所述底物为腔肠素；

所述液体由溶质和溶剂组成，所述溶质为所述分泌型报告蛋白的底物，所述溶剂为PBST缓冲液；所述PBST缓冲液由溶质和溶剂组成，所述溶质为Triton X-100，所述溶剂为磷酸盐缓冲液；所述PBST缓冲液的pH值为7.0-8.5，Triton X-100在所述PBST缓冲液的体积百分浓度为0.01%-0.1%；

所述分泌型荧光素酶为氨基酸序列是序列表中序列2的第1-199位的蛋白质。

2.检测分泌型报告蛋白含量的成套系统，包括权利要求1的方法中所述的DNA分子、底物、结合针对所述标签蛋白的抗体的免疫磁珠和PBST缓冲液。

3.权利要求1所述的方法或权利要求2所述的成套系统的下述1）-7）中的任一种应用：

1）在检测基因表达中的应用；

2）在检测蛋白质-蛋白质相互作用中的应用；

3）在检测T细胞转运中的应用；

4）在检测干细胞转运中的应用；

5）、在制备检测肿瘤发生的产品中的应用；

6）、在制备检测肿瘤治疗应答的产品中的应用；

7）、在制备筛选目标物的产品中的应用。