[发明专利]一种利用低浓度尿素制备铁蛋白-多酚包埋物的方法

说明书

本发明公开了一种利用低浓度尿素制备铁蛋白‑多酚包埋物的方法，包括以下步骤：将铁蛋白溶液置于离心管中，添加尿素溶液，室温避光诱导孵育；取天然多酚类物质，溶于蒸馏水；将多酚溶液和尿素诱导后的铁蛋白溶液混合，4℃避光搅拌，将上述溶液于4℃层析柜中避光透析并过膜即得均匀的铁蛋白‑多酚包埋物溶液。最终产品是一种新型的铁蛋白‑天然多酚物质包埋物的制备方法，为包埋其它食源活性物质提供一种较为缓和、低成本、环保的方法借鉴，在食品、医药和化妆品领域具有很高的实际应用和推广价值。

技术领域

一种利用低浓度尿素制备铁蛋白-多酚包埋物的方法，属于食品技术领域。

背景技术

植物多酚广泛存在于植物体内，其应用领域广泛，提取工艺成熟，生物活性功能众多，包括抗氧化、抗肿瘤、抗老化、抗辐射以及预防心脑血管疾病等多种功能活性。目前，多酚已经应用到工业生产的许多领域，例如：食品天然着色剂、食品防腐剂、化妆品等。然而，由于多酚化合物具有活泼的酚羟基结构，在不适宜pH、高水分活度、光照、高温等条件下易发生氧化、聚合、缩合等反应，从而导致稳定性的降低和生物活性的下降。另一方面，人体摄入的多种食物组分，如蛋白质、碳水化合物、脂类，往往也会对多酚的吸收产生明显的影响。因此，探究如何保持多酚类物质的稳定性以及提高其生物利用度的方法，是目前食品营养领域研究的热点和难题，一直备受国内外学者的关注。

铁蛋白是一类广泛存在于动物、植物及微生物中的天然铁贮存蛋白。由于其独特的球形空壳结构和可逆自组装特性，可用于食源生物活性物质分子的载体化。铁蛋白由24个亚基组成，每两个亚基反向平行形成一组，构成一个近似正八面体，成4-3-2重轴对称中空的球状分子，每个铁蛋白分子形成12个二重轴通道、8个三重轴通道和6个四重轴通道，其通道尺寸容易受到外部环境，如尿素、问题等因素的影响，从而导致尺寸的增大或缩小。外径为12nm，内径为8nm，厚度为2nm，8nm的空穴可容纳4500个三价铁离子。利用铁蛋白的变性复性可逆自组装性质，在蛋白变性体系中添加某种功能组分，那么复性时这些组分可能被包埋在铁蛋白内部空腔内，从而实现了功能组分的铁蛋白装载。在食品和医药领域，利用铁蛋白的可逆自组装特性已成功地包埋原花青素、芦丁等天然多酚物质。然而，必须注意的是，从极端酸性/ 碱性到中性阶段的pH变化可能会影响活性物质的感官特性、储存、生物活性和理化性质，甚至造成样品污染和环境污染。因此，采用一种温和的技术，在不破坏铁蛋白纳米笼的情况下包埋小分子，有助于这些问题的解决。我们在实验过程中通过加入低浓度尿素的方法诱导铁蛋白通道变大，使多酚分子通过扩大的通道包埋进铁蛋白纳米空腔内，从而制备出大小均一、稳定的纳米颗粒包埋物。

以铁蛋白、多酚类物质为原料，通过添加低浓度尿素诱导铁蛋白通道变大的方式包埋多酚物质，制备出均匀分散的铁蛋白-多酚包埋物，这种方法的应用在国内外未见公开报道，未见公开使用。

发明内容

本发明的目的之一是提供一种利用低浓度尿素制备铁蛋白-多酚包埋物的方法。以铁蛋白和多酚物质作为原料，利用低浓度尿素诱导铁蛋白通道变大从而将多酚包埋进纳米空腔里，制备出大小均一、稳定的铁蛋白-多酚包埋物，以期提高多酚物质的稳定性，最终产品是一种新型的铁蛋白-天然多酚物质包埋物的制备方法，为推广多酚在食品中的应用以及为包埋其它食源活性物质、稳态化提供一种低成本、较为环保的方法借鉴。

本发明提供了一种新型的铁蛋白-天然多酚物质包埋物的制备方法，包括以下步骤：将铁蛋白溶液置于离心管中，添加尿素溶液，室温避光诱导孵育；取天然多酚类物质，溶于蒸馏水；将多酚溶液和尿素诱导后的铁蛋白溶液混合，4℃避光搅拌，将上述溶液于4℃层析柜中避光透析并过膜即得均匀的铁蛋白-多酚包埋物溶液。

进一步的，所述铁蛋白溶液的浓度为1.0μM，其pH值为6.8左右。

进一步的，在上述铁蛋白溶液中加入浓度为20mM尿素溶液室温避光诱导孵育。

进一步的，称取多酚类物质溶解在蒸馏水中制备成浓度为1mM的母液。