[发明专利]一种利用植物铁蛋白提高多酚稳定性的方法

说明书

本发明公开了一种利用植物铁蛋白提高多酚稳定性的方法，包括以下步骤：将铁蛋白溶液置于离心管中，用盐酸溶液调节pH值使铁蛋白变性，搅拌；取天然多酚类物质，溶于蒸馏水；将多酚类溶液和上述铁蛋白溶液混合，室温避光搅拌，调节pH值复性，避光搅拌，将上述溶液于4℃层析柜中避光透析三次并过膜，最后即得铁蛋白‑多酚包埋物溶液。最终产品是一种利用植物铁蛋白提高多酚稳定性的方法，既提高了铁蛋白和多酚类物质的推广应用，也为制备均匀的其他食品营养素的复合物以及为其它食源活性物质的包埋、稳态化及其生物利用度的提高提供参考，具有很高的实际应用和推广价值。

技术领域

一种利用植物铁蛋白提高多酚稳定性的方法，属于食品领域技术。

背景技术

植物多酚是一种广泛存在于植物体内的次生代谢产物，是多羟基酚类化合物的总称，可从葡萄、茶叶、石榴等植物中提取得到，具有较强的抗氧化性以及抑菌、抗病毒、抗过敏、抗癌等功效，能够有效地预防和抑制某些疾病的发生。此外，作为纯天然高效抗氧化剂，在食品工业领域中可以用做食品添加剂或防腐剂。由于植物多酚属于纯天然提取物，来源广泛，绿色环保，是国内外天然产物的研究热点。然而，赋予多酚以高生物活性的主要分子基团-多酚羟基对强酸、强碱、光、热、氧等环境条件敏感，易发生氧化、聚合、缩合等反应，从而导致稳定性的降低和生物活性的下降，这些因素限制了多酚的应用。

广泛存在于自然界中的铁蛋白为多酚的载体化提供了可能。铁蛋白是生物体储存铁并使机体免受铁损伤的一种重要的球形空壳状蛋白，由24个亚基组成，每两个亚基反向平行形成一组，再由这十二组亚基对构成一个近似正八面体，成4-3-2重轴对称的球状分子，每个铁蛋白分子形成12个二重轴通道、8个三重轴通道和6个四重轴通道。外径为12nm，内径为8nm，厚度为2nm，8nm的空穴可容纳4500个三价铁离子。利用铁蛋白可逆自组装特性可将小分子多酚物质包埋在纳米空腔内。具体的，脱铁的或重组的铁蛋白在变性条件下(如调节pH值至2.0或添加变性剂)可以解离为单亚基，当恢复pH值至中性时，铁蛋白会恢复其球形结构。利用这一性质，将铁蛋白外壳作为纳米材料，在铁蛋白的变性复性过程中添加小分子多酚物质，将其包埋于铁蛋白的空腔内，且2nm厚度蛋白壳对内部分子会起到很好的屏蔽和包埋作用，使小分子物质免受外界干扰，从而提高其水溶性和稳定性。以铁蛋白、多酚类物质为原料，利用铁蛋白的可逆自组装特性将小分子多酚物质载体化以提高其稳定性的方法应用在国内外未见公开报道，未见公开使用。

发明内容

本发明的目的是提供一种利用植物铁蛋白提高多酚稳定性的方法。以铁蛋白和多酚物质作为原料，利用铁蛋白的可逆组装性质制备出均匀分散的、纳米级别的铁蛋白-多酚包埋物，以期提高多酚物质的稳定性，最终产品是一种利用铁蛋白稳定多酚的方法，为推广多酚在食品中的应用以及为其它食源活性物质的包埋、稳态化及其生物利用度的提高提供参考。

本发明提供了一种利用植物铁蛋白提高多酚稳定性的方法，包括以下步骤：将铁蛋白溶液置于离心管中，用盐酸溶液调节pH值使铁蛋白变性，亚基解离，搅拌；取天然多酚类物质，溶于蒸馏水；将多酚类溶液和上述铁蛋白溶液混合，室温避光搅拌，调节pH值复性，避光搅拌，将上述溶液于4℃层析柜中避光透析三次并过膜即得铁蛋白-多酚包埋物溶液。

进一步的，所述铁蛋白溶液的浓度为1.5μM，其pH值为7左右。

进一步的，用1M HCl调节所述铁蛋白溶液pH值至2.0左右。

进一步的，室温搅拌变性的铁蛋白溶液1h。

进一步的，铁蛋白和天然多酚类溶液混合时的分子摩尔比为1∶120。

进一步的，铁蛋白和多酚类溶液混合室温搅拌2h。

进一步的，用1MNaOH调节溶液pH值至7.0左右复性。

进一步的，复性后4℃层析柜中搅拌1h以上。

进一步的，透析时使用的透析袋孔径10kDa。