[发明专利]茵栀黄颗粒HPLC指纹图谱的建立方法及其标准图谱

说明书

本发明公开了一种茵栀黄颗粒HPLC指纹图谱的建立方法，该方法包括供试品溶液的制备、HPLC色谱条件的确定及HPLC标准指纹图谱的制作。本发明同时公开了由该方法得到的茵栀黄颗粒HPLC标准指纹图谱，该指纹图谱有29个共有峰，其相对保留时间t_R依次分别为0.079，0.087，0.113，0.341，0.436，0.563，0.648，0.8660.891，0.905，0.919，1.000，1.089，1.129，1.161，1.197，1.395，1.453，1.496，1.597，1.776，1.808，1.979，2.071，2.136，2.168，2.353，2.396，2.440。本发明方法操作简便、稳定性高、重现性好，所得图谱特征峰多，通过标准指纹图谱共有峰的比较，可对茵栀黄颗粒的质量进行全面评价，有利于稳定产品质量，确保临床用药的安全性、有效性。

技术领域

本发明涉及一种茵栀黄颗粒HPLC指纹图谱的建立方法及其HPLC标准指纹图谱，属于中药制剂分析领域。

背景技术

茵栀黄颗粒收载于《中国药典》2015年版一部中，由茵陈(绵茵陈)提取物、栀子提取物、黄芩提取物、金银花提取物制备而成，具有清热解毒，利湿退黄的功能，用于肝胆湿热所致的黄疸，症见面目悉黄、胸胁胀痛、恶心呕吐、小便黄赤；急、慢性肝炎见上述证侯者，具有确切的临床疗效，已收载入《国家基本药物目录(2012年版)》。

现行《中国药典》中茵栀黄颗粒质量控制方法主要包括鉴别和含量测定，其中鉴别项采用薄层色谱法，分别鉴定处方中的茵陈提取物、栀子提取物、黄芩提取物，采用特征图谱鉴别茵陈提取物、金银花提取物中的6个有机酸成分，含量测定项使用高效液相色谱法测定茵陈提取物中对羟基苯乙酮的含量、栀子提取物中栀子苷的含量、黄芩提取物中黄芩苷的含量以及金银花提取物和茵陈提取物中绿原酸的含量。从处方组成可以发现，茵栀黄颗粒由四味提取物制成，但其质量标准仅用薄层色谱法鉴定提取物和高效液相色谱法检测提取物中一个指标性成分的含量，以此来控制茵栀黄颗粒的质量不够全面、准确。

中药指纹图谱作为一项质量控制技术，能够较为全面的控制药品的质量，具有系统性、整体性特点。目前，以指纹图谱控制茵栀黄颗粒的质量，国内外尚未见专利公开及文献报道。本发明公开了一种茵栀黄颗粒HPLC指纹图谱的建立方法，以及用该方法制作的茵栀黄颗粒HPLC标准指纹图谱。在用相似度进行评价的情况下，可用其标准指纹图谱对茵栀黄颗粒的质量进行全面地评价和控制，从而保证了产品质量的稳定性及临床用药的有效性与安全性。

发明内容

本发明的目的是针对现有茵栀黄颗粒质量控制方法的不足，提供一种茵栀黄颗粒HPLC指纹图谱的建立方法及用该方法所得的HPLC标准指纹图谱。其特点是将茵栀黄颗粒制备成供试品溶液，经过HPLC分离检测，获得茵栀黄颗粒HPLC标准指纹图谱，从而为茵栀黄颗粒的真伪鉴别和内在质量提供可靠依据。

本发明一种茵栀黄颗粒HPLC指纹图谱的建立方法，包括如下步骤：

1)供试品溶液的制备：取茵栀黄颗粒，置具塞锥形瓶中，加入40％-70％甲醇，超声处理20min-50min，放冷，滤过，取续滤液即得供试品溶液；

2)HPLC色谱条件的确定：精密吸取供试品溶液，经HPLC分离检测，其中流动相的组成为乙腈：0.05％-0.2％磷酸溶液，采用梯度洗脱。

3)指纹图谱的制作：按步骤2)色谱条件对茵栀黄颗粒样品进行分析，得HPLC色谱图，对色谱图进行比较，得到由样品共有特征峰构成的茵栀黄颗粒HPLC标准指纹图谱。

优选地，供试品溶液具体按如下步骤制备：精密称取茵栀黄颗粒5g，置具塞锥形瓶中，精密加入50％甲醇20ml，超声处理40min，放冷，滤过，取续滤液即得供试品溶液。