[发明专利]一种血清类胰蛋白酶的化学发光定量检测试剂盒及其制备方法和检测方法

权利要求书

1.一种血清类胰蛋白酶的化学发光定量检测试剂盒，其特征在于：包括如下试剂：

浓度为0.1~1 mg/mL的链霉亲和素标记的纳米磁微粒悬浮液；

浓度为0.5~5μg/mL的生物素标记的鼠抗人类胰蛋白酶抗体溶液；

浓度为0.2~1μg/mL的碱性磷酸酶标记的鼠抗人类胰蛋白酶抗体溶液。

2.根据权利要求1所述的血清类胰蛋白酶的化学发光定量检测试剂盒，其特征在于：所述的鼠抗人类胰蛋白酶抗体与所述的生物素的投料摩尔比为1:5~1:20；所述的碱性磷酸酶与所述的鼠抗人类胰蛋白酶抗体的投料摩尔比为2:1~10:1。

3.根据权利要求1所述的血清类胰蛋白酶的化学发光定量检测试剂盒，其特征在于：所述的生物素为Sulfo-NHS-Biotin、NHS-LC-Biotin或NHS-LC-LC-Biotin。

4.根据权利要求1所述的血清类胰蛋白酶的化学发光定量检测试剂盒，其特征在于：所述的试剂盒还包括类胰蛋白酶校准品和类胰蛋白酶质控品。

5.根据权利要求4所述的血清类胰蛋白酶的化学发光定量检测试剂盒，其特征在于：所述的类胰蛋白酶校准品包括浓度为0.9~1.1μg/L、4.5~5.5μg/L、11.25~13.75μg/L、45~55μg/L、180~220μg/L的类胰蛋白酶溶液；所述的类胰蛋白酶质控品包括浓度为4~6μg/L、40~60μg/L的类胰蛋白酶溶液。

6.一种如权利要求1至5中任一项所述的血清类胰蛋白酶的化学发光定量检测试剂盒的制备方法，其特征在于：

所述的生物素标记的鼠抗人类胰蛋白酶抗体溶液的制备方法为：将鼠抗人类胰蛋白酶抗体加入到溶解有生物素的二甲基亚砜中，15~40℃下混合反应50~70min，再用0.009~0.011mol/L、pH为7.3~7.5的磷酸盐缓冲液进行透析制得所述的生物素标记的鼠抗人类胰蛋白酶抗体溶液；

所述的链霉亲和素标记的纳米磁微粒悬浮液的制备方法为：将链霉亲和素标记的纳米磁微粒经磁分离器沉淀出来后，用0.009~0.011mol/L、pH为7.3~7.5的磷酸盐缓冲液进行多次清洗，然后将清洗后的链霉亲和素标记的纳米磁微粒复溶于0.009~0.011mol/L、pH为7.3~7.5的磷酸盐缓冲液制得所述的链霉亲和素标记的纳米磁微粒悬浮液；

所述的碱性磷酸酶标记的鼠抗人类胰蛋白酶抗体溶液的制备方法为：将浓度为1.0~5.0mg/mL的碱性磷酸酶溶液与鼠抗人类胰蛋白酶抗体按摩尔比为2：1~10：1进行混合后并纯化，得到碱性磷酸酶标记的鼠抗人类胰蛋白酶抗体，再用0.045~0.055 mol/L、pH值为5.5~6.5的2-(N-吗啉代)乙磺酸缓冲液对碱性磷酸酶标记的鼠抗人类胰蛋白酶抗体稀释制得所述的碱性磷酸酶标记的鼠抗人类胰蛋白酶抗体溶液。

7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于：所述的制备方法还包括类胰蛋白酶校准品的制备和类胰蛋白酶质控品的制备，所述的类胰蛋白酶校准品通过将类胰蛋白酶蛋白与0.09~0.11mol/L、pH为7.3~7.5的三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液进行配置得到，所述的类胰蛋白酶质控品通过将类胰蛋白酶蛋白与0.09~0.11mol/L、pH为7.3~7.5的三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液进行配置得到。