[发明专利]一种复染染色试剂盒及制备和应用

说明书

本发明属于生物医药领域，具体涉及一种复染染色试剂盒及其制备方法和应用，硫堇染色液利用酸解的方法可打断DNA分子链中的嘌呤‑脱氧核糖链，即去嘌呤作用，然后DNA部分区域发生重排，暴漏出醛基，硫堇能与细胞中的醛基反应形成一种醌型化合物，使细胞核DNA染成蓝色；改良后EA50染色液，在常用EA50染色液中添加适量橘黄G染色液，将EA50染色和橘黄G染色两个步骤合二为一，显著节约试剂成本，提高染色效率，可将胞浆染成颜色鲜明的绿色、蓝色、粉色和橙黄色，结构层次清晰，便于观察及诊断。

技术领域

本发明属于生物医药领域，具体涉及一种病理学诊断中组织学和细胞学标本染色的特殊染色试剂，具体涉及一种复染染色试剂盒及制备方法和应用。

背景技术

本发明的一种复染染色试剂盒，区别于常用的复染试剂盒，可用于病理学诊断中组织学、细胞学染色。

硫堇染色液利用酸解的方法可打断DNA分子链中的嘌呤-脱氧核糖链，即去嘌呤，然后DNA部分区域发生重排，暴漏出醛基，硫堇能与细胞中的醛基反应形成一种醌型化合物，使细胞核DNA染成蓝色。硫堇分子式C14H13N3O2S，结构式如下：

改良后的EA50染色液：在常用EA50染色液中添加适量橘黄G染色液，将EA50染色和橘黄G染色两个步骤合二为一，显著节约试剂成本，提高染色效率。可将胞浆染成颜色鲜明的绿色、蓝色、粉色和橙黄色，结构层次清晰，便于观察及诊断。

发明内容

本发明的目的是提供一种复染染色试剂盒及制备和应用，可用于病理诊断学中组织学和细胞学的特殊染色。

本发明提供了所述一种复染染色试剂盒及制备：

本发明的一种复染染色试剂盒，包括硫堇染色液和改良后EA50染色液；

一种复染染色试剂盒，其特征在于：由硫堇染色液和改良后EA50染色液组成，其中：

硫堇染色液：每1000ml硫堇染色液中包括： 硫堇（硫堇劳氏紫粉末）0.5-3.0g；染料助剂0.5-2g；醇20-80ml；强酸10-15ml；余量为水；

改良后EA50染色液：每1000ml所述EA50染色液中包括：亮绿0.5-0.8g、伊红3-6g、弱酸（20-30ml)、甲醇（220-300ml)、磷钨酸（1-4g），橘黄G（0.002-0.010g），余量为乙醇。

根据权利要求1所述的复染染色试剂盒，其特征在于：

所述染料助剂为亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠中的至少一种；

所述醇为乙醇、甲醇、乙二醇、丙二醇、丙三醇中的至少一种；

所述乙醇为95%乙醇或无水乙醇；

所述弱酸为乙酸、水杨酸和柠檬酸的一种或多种的混合物；

所述伊红为乙酸水溶性伊红或醇溶性伊红；

所述水为蒸馏水、去离子水、纯化水及体外诊断试剂用纯化水。

根据权利要求1-2任一所述的复染染色试剂盒的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

1）硫堇染色液的配制:

a） 将水加热至50-70℃，加入硫堇，搅拌50-90min，冷却室温过滤；

b） 加入染料助剂和醇，搅拌均匀；

c） 使用前，加入强酸，搅拌50-90min，搅拌温度控制在20-30℃，注意避光，搅拌结束后直接用于染色；

2）改良后EA50染色液的配制：

a）亮绿：适量的亮绿充分溶解于20ml水中；