[发明专利]极地海洋微生物产生的几种溶栓化合物的制备方法及用途

说明书

本发明公开了极地海洋微生物产生的几种溶栓化合物的制备方法及用途；采用YM培养基对Geomyces pannorum菌种进行活化；活化结束后，用改良查氏培养基对活化后的菌种进行发酵；加入与改良查氏培养基等体积的甲醇，超声处理后离心分离，取上清液减压浓缩、真空干燥；得到的干固物经硅胶柱层析梯度洗脱分别得到化合物1‑6。化合物1‑6显示溶栓活性，评价体系的EC₅₀分别为300,120.0,181.3,300,200.0and 179.7μg/mL。具有溶栓活性的化合物1‑6，可作为溶栓药物治疗或预防血栓栓塞性疾病。

技术领域

本发明涉及极地海洋微生物产生的几种溶栓化合物的制备方法及用途。

背景技术

血栓性疾病是引起人类死亡的三大疾病之一，严重威胁人类生命和健康，血栓性疾病引起的死亡人数已经超过恶性肿瘤。溶栓疗法是早期急性心肌梗塞和血栓栓塞性疾病的有效治疗方法。纤溶疗法是早期急性心肌梗塞和其它血栓性疾病的有效治疗方法，这种疗法是通过药物激活血液潜在活性的纤溶酶原，形成活性的纤溶酶降解血栓成纤维蛋白降解产物而溶解血栓。纤溶疗法被誉为20世纪心脑血管药理学领域的十大发现之一。

国内外临床上使用的溶栓药物近百种，典型的是链激酶(streptokinase，SK)、尿激酶(urokinase-type plasminogen activator，UK，u-PA)、重组组织型纤溶酶原激活剂(recombinant tissue-type plaminogen activator，rt-PA)，对-甲氧苯甲酰纤溶酶原链激酶激活剂复合物(anisoylated plasmsnogen streptokinase activator complex，APSAC)和重组链激酶(reeombinant streptokinase，r-sK)等。

典型的纤溶疗法在临床上使用的药品如组织型纤溶酶原激活剂、尿激酶型纤溶酶原激活剂等会带来出血的重大危险性，只能用于治疗严重血栓患者。由于纤溶酶原激活剂类药物存在安全性问题，研究者正在使用组织型纤溶酶原激活剂重组变异体(Recombinantvariants of tissue-type plasminogen activator，rt-PA)等低分子量化合物以降低出血危险性，活化的血液蛋白质C的抗凝血作用和促进纤溶作用正在受到关注。在临床上，消除血栓的药物如血小板膜特异性糖蛋白抑制剂阿昔单抗，除了具有出血危险性外，还带来了像阿司匹林减少血小板的副作用。

心脑血管药理学领域正亟需出血危险性小、不损伤血液因子、专一性高的小分子化合物作为药物的出现，寻找这样的小分子化合物并将其开发成高效、特异、安全的溶栓药物一直是全球的研究热点。

发明内容

本发明的目的在于提供极地海洋微生物产生的几种溶栓化合物的制备方法及用途。该类具有溶栓活性的化合物1-6，能提高纤溶酶原活性，具有很好的溶栓活性。

本发明目的是通过以下技术方案来实现的。

第一方面，本发明涉及几种具有溶栓活性的化合物的制备方法，所述方法包括如下步骤：

S1、采用YM培养基对Geomyces pannorum菌种进行活化；

S2、活化结束后，用改良查氏培养基对活化后的菌种进行发酵；

S3、加入与改良查氏培养基等体积的甲醇，超声处理后离心分离，取上清液减压浓缩、真空干燥；得到的干固物经硅胶柱层析梯度洗脱分别得到化合物1-6，即所述具有溶栓活性的化合物；所述梯度洗脱对应的条件为CH₂Cl₂:MeOH:H₂0,50:1:0→25:1:0→10:1:0.1→4:6:1(即，CH₂Cl₂:MeOH:H₂0的体积比为50:1:0、25:1:0、10:1:0.1、4:6:1)；