[发明专利]一种制备四种氯化烟碱类杀虫剂通用抗原的方法

权利要求书

1.一种制备四种氯化烟碱类杀虫剂通用抗原的方法，其中氯化烟碱类杀虫剂为啶虫脒、吡虫啉、噻虫啉和烯啶虫胺，其特征在于包括如下步骤：

（1）Ni-Al₂O₃催化剂的合成

在烧杯中加入200mL去离子水，置于加热反应器上加热至80℃，然后将浓度均为1M的100mL硝酸镍溶液和100mL碳酸钠溶液同时加入到烧杯中，在机械搅拌状态下反应1~2h，然后将溶液的pH调整到8.5，随后加入5g氧化铝粉，继续加热搅拌反应50min，将溶液抽滤并用水洗4次，然后将滤饼放入烘箱中120℃条件下过夜烘干，研磨过筛；再将研磨过筛的粉末置于管式还原器中500℃下煅烧3h，再通入氮气、氢气反应3h后关闭加热使其自然降温，将制得的固体催化剂密封保存；

（2）氯化烟碱类杀虫剂通用人工半抗原的合成

称取20mg啶虫脒于100mL反应瓶中，加入5mL甲醇将其溶解，再加入5mg步骤（1）制备的催化剂，然后抽真空，通入氨气和氢气，使得体系的反应压力在0.5MPa，于室温下反应2~4h后，将反应液进行离心分离出上清液体，再在35℃条件下用旋转蒸发仪将溶剂旋干，旋干后的固体即为氯化烟碱类杀虫剂通用人工半抗原；

（3）氯化烟碱类杀虫剂通用人工完全抗原的合成

将步骤（2）制备的半抗原用1mL甲醇溶解，然后再加入5mL 0.01M pH7.2的PBS缓冲液，置于磁力搅拌器上进行搅拌，在搅拌的状态下加入0.5~1mL稀释10倍的25%戊二醛溶液，室温搅拌反应20min，将其逐滴加入到10mL 0.01M pH7.2的PBS缓冲液溶解的50~100mg牛血清蛋白BSA中，室温反应3h后将反应液在PBS缓冲液中透析3次，透析后的溶液即为氯化烟碱类杀虫剂通用人工完全抗原；

（4）氯化烟碱类杀虫剂通用人工完全抗原的鉴定

用10%的SDS-PAGE凝胶电泳和紫外吸收光谱对合成的完全人工抗原进行鉴定。

2.根据权利要求1 所述的一种制备四种氯化烟碱类杀虫剂通用抗原的方法，其特征在于所述的步骤（1）中反应体系的机械搅拌反应时间为1.5h。

3.根据权利要求1 所述的一种制备四种氯化烟碱类杀虫剂通用抗原的方法，其特征在于所述的步骤（2）中合成半抗原的反应时间为3h。

4.根据权利要求1 所述的一种制备四种氯化烟碱类杀虫剂通用抗原的方法，其特征在于所述的步骤（3）中戊二醛的添加量为0.7mL。

5.根据权利要求1 所述的一种制备四种氯化烟碱类杀虫剂通用抗原的方法，其特征在于所述的步骤（3）中BSA的添加量为80mg。