[发明专利]一种猕猴桃多酚含量测定方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种测定方法，具体涉及一种猕猴桃多酚测定方法。

背景技术

猕猴桃在我国广泛种植，猕猴桃中含有多种营养物质如维生素C、多酚等，长期食用猕猴对人的身体健康具有巨大帮助。

多酚拥有抗氧化效果，适当摄取可以预防疾病，增强身体抗御能力。但过量摄取会引起肝脏和肠道不适，严重的更会造成肝脏损伤。因此应该严格控制摄入量，人每次的安全口服剂量不超过0.25g。找到一种方法准确测出猕猴桃中的多酚含量,即可知道每次食用多少猕猴桃比较合适。现有技术中有较多的猕猴桃多酚含量测定方法，但测定时采用一步浸提，不能将猕猴桃汁中搜有多酚提取出来，测得的含量差别较大，不够准确。

发明内容

针对上述现有现有技术，本发明要解决猕猴桃多酚含量测定不够准确的技术问题。

为了达到上述目的，本发明所采用的技术方案是：提供一种猕猴桃多酚含量测定方法，具体步骤为：

(1)浸提：取一定量榨好的猕猴桃汁和体积分数为50％的醇溶液放于20mL容量瓶中，在61～64℃条件下浸提45min；

(2)测定吸光度数值：浸提完成后，取10mL浸提液，在5000r/min的条件下离心15min；离心完成后，取上层清液，在特征吸收波长715nm处测其吸光度数值；

(3)重复浸提：取离心后的上清液，重复步骤(1)、(2)5次；

(4)计算多酚当量：将5次测得的吸光度数值带入预先拟合出的标准曲线方程y＝2.8758x+0.4960中，计算出没食子酸当量值，即多酚含量；所述标准曲线中y代表多酚质量浓度，x代表吸光度数值；

(5)计算多酚含量：多酚含量的计算公式为：W＝C×V/M；其中，W为多酚的含量，C为没食子酸当量，即依据标准曲线计算出的多酚含量，V为浸提液的体积，M为取液量；将5次测得的多酚含量相加即得总多酚含量。

本发明的有益效果是：用醇溶液进行浸提，对人员和环境友好，不会造成人员受伤和环境污染的问题。浸提温度和时间适中，多酚类物质不会分解或氧化，保证了多酚含量测定的准确度。浸提完成后，浸提液在离心机的作用下离心15min，浸提液中的多酚类物质和杂质充分分离后进入上层清液，测定结果更加准确。特征吸收波长提前由没食子酸标准溶液测出，在测定多酚含量时将上清液放入紫外分光光度计后，直接在715nm处测量吸光度即可，方便省时。测出吸光度数值后，带入预先拟合好的标准曲线方程，经过计算即可得出多酚的质量浓度，方便快捷。多次重复对上层清液中的多酚进行浸提，可以最大限度的将上层清液中的多酚提取干净，将每次浸提得到的多酚含量进行相加后，可以得到更为准确的猕猴桃多酚含量。

在上述技术方案的基础上，本发明还可以做如下改进。

进一步，步骤(2)中特征吸收波长的确定方法为：取1mL没食子酸标准溶液、1mL福林酚试剂和14mL水放入20mL容量瓶内，均匀混合后在1～5min内加入3mL 20wt％的碳酸钠溶液，混合均匀后定容；在25℃条件下放置1h，用紫外分光光度计在200～800nm之间进行全波长扫描，测定最大吸收时的波长；测出的特征吸收波长为715nm。

采用上述进一步技术方案的有益效果是：提前确定出没食子酸的特征吸收波长，在测定猕猴桃多酚含量时可直接使用，节约大量时间。配置好溶液后放置在25～30℃条件下，猕猴桃成熟期内的室温正好处于该范围，即将配置好的溶液放置在室内即可，不用额外的升温或降温处理，操作简单，节约能源。在确定特征吸收波长时，在200～800nm范围内全波长扫描，扫描波长范围覆盖了紫外光和可见光范围，能够准确确定没食子酸的特征吸收波长。

进一步，步骤(3)中标准曲线拟合的具体步骤为：

(1)配制梯度浓度溶液：将100mg没食子酸放到20mL容量瓶中，用2mL乙醇溶解后定容至20mL；移取上述溶液0mL、0.2mL、0.4mL、0.6mL、1mL和2mL到20mL容量瓶中，加水定容至20mL，得一系列梯度浓度溶液；各取上述梯度浓度溶液0.2mL、福林酚试剂1mL和14mL水放入20mL容量瓶中，均匀混合后在1～5min内加入3mL 20wt％的碳酸钠溶液，混合均匀后定容；在25℃条件下放置1h；