[发明专利]一种利用气相色谱-质谱分析方法同时检测糖醛酸和醛糖的方法

权利要求书

1.利用气相色谱-质谱分析方法同时检测葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、甘露糖、鼠李糖、岩藻糖、核糖、阿拉伯糖和木糖的方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)衍生方法

精密称取10种对照样品，即葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、甘露糖、鼠李糖、岩藻糖、核糖、阿拉伯糖和木糖，各5mg，加入1mL水溶解，然后加入10mg四氢硼钠和10μL氨水，室温静置1.5h，加入适量冰乙酸，浓缩至干，加入1％v/v盐酸甲醇溶液中和，浓缩至干，重复几次，直至无酸味；加入100μL吡啶溶解，再加入330μL六甲基二硅胺烷和110μL三甲基氯硅烷，70℃水浴，反应30min；反应后，加入100μL水，离心，取上层溶液，可直接进行气相色谱分析；

2)样品的制备

取完全水解后的样品溶液1ml，加入10mg四氢硼钠和10μL氨水，室温静置1.5h，加入适量冰乙酸，浓缩至干，加入1％v/v盐酸甲醇溶液中和，浓缩至干，重复几次，直至无酸味；加入100μL吡啶溶解，再加入330μL六甲基二硅胺烷和110μL三甲基氯硅烷，70℃水浴，反应30min；反应后，加入100μL水，离心，取上层溶液，可直接进行气相色谱分析；

3)GC-MS分析

采用Agilent 7890A-5975C气质联用仪，采用DB-5毛细管柱，规格为60m×0.25mm×0.25μm，程序升温，柱温180℃，以4℃/min至190℃，以1℃/min至200℃，以2℃/min至230℃，以20℃/min至310℃，氦气作载气，进样口温度250℃，柱流速1.2mL/min；EI 70eV，接口温度250℃，离子源温度230℃，扫描范围:m/z50-550，扫描率:2.5scan/s；GC-MS分析，用内标法定量多糖样品中的单糖组分，肌醇作为内标物；

4)标准曲线的建立

配制混合单糖标准品储备液，含Glc、Gal、Man、Ara、Xyl、Rha、Fuc、Rib、GlcUA和GalUA；肌醇设定为内标物，其浓度为2.0mg/mL；把混合单糖稀释成不同浓度，各单糖浓度均分别依次为0.1mg/mL、0.25mg/mL、0.5mg/mL、1.0mg/mL、2.0mg/mL、5.0mg/mL和10.0mg/mL，以不同浓度时的单糖对照品峰面积与内标峰面积之比为纵坐标，以每种单糖的浓度为横坐标进行线性回归分析；

5)用内标法定量样品溶液中葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、甘露糖、鼠李糖、岩藻糖、核糖、阿拉伯糖和木糖的含量。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的样品溶液为麻黄根多糖溶液或刺五加叶皂苷溶液。