[发明专利]自身免疫疾病诊断用液相蛋白芯片、试剂盒及制作方法

权利要求书

1.一种液相蛋白芯片在制备用于自身免疫疾病的诊断产品中的应用，其特征在于，所述液相蛋白芯片包括磁性微珠以及固定在所述磁性微珠表面的自身免疫疾病相关抗原的重组融合蛋白，所述重组融合蛋白包括自身免疫疾病抗原以及连接在所述自身免疫疾病抗原的N端的标签蛋白；

所述磁性微珠的表面连接有生物素化的牛血清白蛋白，所述自身免疫疾病抗原的C端连接有链霉亲和素，所述磁性微珠与所述重组融合蛋白通过生物素和链霉亲和素连接；

所述生物素化的牛血清白蛋白是通过氨基偶联试剂连接在羧基化的所述磁性微珠表面；所述标签蛋白是Myc和Histag；

所述Myc位于所述Histag的N端，所述Histag的C端与所述自身免疫疾病抗原的N端连接；

所述自身免疫疾病为系统性红斑狼疮，编码所述自身免疫疾病抗原的氨基酸序列为SEQ ID NO.3所示，编码所述标签蛋白的DNA序列如SEQ ID NO.2所示。

2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述液相蛋白芯片的制作方法包括如下步骤：

在避光震荡条件下，在羧基化的磁性微珠表面通过氨基偶联试剂连接上生物素化的牛血清白蛋白，得到磁性微珠-BSA-Biotin；

在避光震荡条件下，将所述磁性微珠-BSA-Biotin与自身免疫疾病相关抗原的重组融合蛋白混合，所述重组融合蛋白包括自身免疫疾病相关抗原以及与所述自身免疫疾病相关抗原连接的链霉亲和素，混合后链霉亲和素与生物素连接，即得包被有自身免疫疾病相关抗原的液相蛋白芯片。

3.一种试剂盒在制备用于自身免疫疾病的诊断产品中的应用，所述自身免疫疾病为系统性红斑狼疮，其特征在于，含有如权利要求1～2中任一项所述的液相蛋白芯片在制备用于自身免疫疾病的诊断产品中的应用中所限定的液相蛋白芯片。

4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述试剂盒还含有标准品、质控参比品以及荧光标记二抗中的至少一种试剂。

5.如权利要求4所述的应用，其特征在于，所述标准品及所述质控参比品均为Anti-Myc嵌合抗体试剂；所述荧光标记二抗为抗人IgG-Fc-PE抗体。