[发明专利]一种MYLK4基因辅助检测牛生长性状的方法及其专用试剂盒

权利要求书

1.一种黄牛MYLK4基因单核苷酸多态性的检测方法，其特征在于：包括以下步骤：

以黄牛基因组DNA为模板，以引物对P为引物，PCR扩增黄牛MYLK4基因部分片段，将PCR扩增产物经限制性内切酶HhaI消化后，进行琼脂糖凝胶电泳，根据电泳结果鉴定黄牛MYLK4基因单核苷酸多态性位点的基因型；

所述引物对P的序列为：

上游引物F：5’-CGGACACTTGTTCTCAATCGGC-3’

下游引物R：5’-GTGGTCTAGGAATCTGGGTG-3’；

所述黄牛MYLK4基因单核苷酸多态性位点的基因型的电泳结果为：AA基因型表现为208bp一条条带；AG基因型表现为208bp、185bp和23bp三条条带；GG基因型表现为185bp和23bp两条条带。

2.根据权利要求1所述一种黄牛MYLK4基因单核苷酸多态性的检测方法，其特征在于：所述PCR扩增的反应程序为：94℃预变性5min；94℃变性30s，61℃退火30s，72℃延伸25s，共36个循环；72℃延伸5min。

3.根据权利要求1所述一种黄牛MYLK4基因单核苷酸多态性的检测方法，其特征在于：所述琼脂糖凝胶电泳使用的是质量浓度3％的琼脂糖凝胶。

4.如权利要求1所述的黄牛MYLK4基因单核苷酸多态性的检测方法在辅助检测黄牛生长性状中的应用，其特征在于：所述生长性状选自体高或体斜长。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：所述黄牛选自秦川牛、皮南牛、夏南牛、南阳牛或柴达木黄牛。

6.一种MYLK4基因辅助检测牛生长性状的专用试剂盒，其特征在于：包括用于进行基于PCR-RFLP法的MYLK4基因单核苷酸多态性位点分型的引物对P，所述引物对P的序列为：

上游引物F：5’-CGGACACTTGTTCTCAATCGGC-3’

下游引物R：5’-GTGGTCTAGGAATCTGGGTG-3’。