[发明专利]一种自身免疫性糖尿病检测用反应膜条、制备和使用方法

说明书

技术领域

本发明属于生物医学领域，具体涉及一种自身免疫性糖尿病检测用反应膜条、制备和使用方法。

背景技术

人体免疫系统的主要功能是识别和清除抗原性异物。正常情况下，机体对自身组织成分一般不会产生免疫应答，称为免疫耐受。一旦这种耐受被打破，就会发生自身免疫性疾病。自身免疫性疾病突出表现为血清中多种自身抗体的形成及全身多脏器损伤。在自身免疫性疾病中，自身免疫性糖尿病较常见。

糖尿病主要依据其病因学的不同而进行分型，其中免疫介导的1型糖尿病，患者血清中可检测到针对胰岛β细胞的自身抗体，是存在免疫损害的有力佐证。虽然在过去的数十年中，人们在患者血清中发现了多种自身抗体，但目前认为主要以胰岛细胞抗体（ICA）、谷氨酸脱羟酶抗体（GAD）、胰岛素自身抗体（IAA）、蛋白酪氨酸磷酸酶抗体（IA-2A）、锌转运蛋白8抗体（Znt-8A）、人类重组酶（E2L3）、真核翻译延长因子（EEF1A1）、羧基肽酶H抗体（CP-HA）、SOX13抗体（SO-XA）等，这些特异性自身抗体是自身免疫性糖尿病诊断标准中重要的组成部分。

谷氨酸脱羧酶(GAD)是人及动物体内抑制神经递质γ-氨基丁酸的合成酶。1型糖尿病是遗传易感个体通过自身抗原介导的免疫反应所引起胰岛β细胞破坏的自身免疫性疾病，GAD是此免疫反应关健的始动靶抗原，因此GAD-Ab是糖尿病前期个体较特异的免疫指标。GAD-Ab的测定意义为：①可作为1型糖尿病的预测；②从2型糖尿病患者中鉴别迟发型1型糖尿病，此类患者常可出现GAD-Ab的高水平，并稳定维持，可考虑早期干预治疗；③可作为普查手段，以发现1型糖尿病的高危人群和个体。

胰岛素自身抗体（IAA）出现在未使用过外源性胰岛素或使用时间不超过7-10天的个体中产生针对内源性胰岛素的自身抗体，与年龄呈负相关，随着增龄，IAA阳性率呈现下降趋势，被认为是持续时间最短的抗体。IAA单独测定意义不大，但与ICA、GAD等联合检测，可增加对1型糖尿病的预测程度。

胰岛细胞抗体(ICA)为抗胰岛β细胞所有抗体的总称。目前认为，ICA阳性预示β细胞的自身免疫损害，只能作为糖尿病的高危指标。在儿童阳性或高水平持续阳性，对l型糖尿病才具有较高的预测率。

蛋白酪氨酸磷酸酶抗体（IA-2A）特异性较强，在不伴有1型糖尿病的自身免疫患者中较少发现。可作为1型糖尿病高危人群筛查指标。

锌转运蛋白8抗体（Znt-8A）具有高度的β细胞特异性，锌转运蛋白8（Znt-8）抗原是通过影响锌离子浓度而在胰岛素合成和分泌中发挥重要作用，对糖尿病自身抗体免疫介导的1型糖尿病有着重要的诊断和预测价值。特别是其他自身抗体阴性的患者有着重要的诊断价值。

人类重组酶（E2L3）以及真核翻译延长因子（EEF1A1）分别参与蛋白质的翻译和退化，EEF1A1与felty综合征有关，一种自身免疫性疾病。UBE2L3有自身免疫性疾病如类风湿性关节炎、克罗恩病和系统性红斑狼疮有关，蛋白质体内平衡与这些自身抗体有关，可以反映出T1DM的自身免疫。相应的两个自身抗原免疫荧光染色胰腺，结果抗原都结合在胰腺胰岛β-cells而不是腺泡细胞和a-cells。这两个新颖的自身抗体可以添加一个新维度的诊断、分类、治疗和1型糖尿病的发病机理。

几种抗体联合检测可提高1型糖尿病的诊断敏感性和诊断符合率,对1型糖尿病早期诊断具有重要价值。

另外，世界卫生组织在对糖尿病分型的新建议中提出，成人隐匿性自身免疫糖尿病（LADA）属于1型糖尿病的亚型，与1型糖尿病的自身免疫发病机制相同。胰岛自身抗体为目前诊断该疾病的主要依据。

羧基肽酶位于胰岛细胞分泌颗粒及神经内分泌细胞，是与肽类激素和神经递质的产生有关的一种糖蛋白酶可催化胰岛素原向胰岛素的转化。羧基肽酶H抗体（CP-HA）对成人隐匿性自身免疫糖尿病（LADA）有诊断价值。

SOX13抗体（SO-XA）诱发的自身免疫反应可发生于GAD-Ab和CP-HA均阴性的DM患者在，SO-XA的检测可以提高诊断LADA的敏感性，SO-XA阳性患者具有病程长、临床多样等特点。

GAD、CP-HA、SO-XA等是诊断LADA的主要传统学指标。

本发明的自身免疫性糖尿病免疫印迹检测试剂盒可针对自身免疫性糖尿病的9种抗体同时进行检测，从而使得我们该类患者的病况有了更快速、直观、准确、全面的判断，利于对患者进行及时的诊断和正确的治疗，减少和延缓糖尿病并发症的发生和发展。

发明内容