[发明专利]一种抗苹果坏死花叶病毒的抗血清及其制备方法有效
| 申请号： | 201710790136.0 | 申请日： | 2017-09-05 |
| 公开（公告）号： | CN107446041B | 公开（公告）日： | 2021-04-06 |
| 发明（设计）人： | 李世访;邢飞;王红清 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院植物保护研究所 |
| 主分类号： | C07K16/10 | 分类号： | C07K16/10;C07K16/06;C07K14/08;C12N15/70;G01N33/68 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人： | 关畅;张立娜 |
| 地址： | 100193 北京市海淀区圆明*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 苹果 坏死 花叶 病毒 血清 及其 制备 方法 | ||
1.一种制备抗苹果坏死花叶病毒的抗血清的方法，包括如下步骤：以苹果坏死花叶病毒的外壳蛋白作为免疫原免疫动物；
所述苹果坏死花叶病毒的外壳蛋白为氨基酸序列为序列表中的序列1的蛋白质。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述动物为新西兰兔。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：作为免疫原的所述苹果坏死花叶病毒的外壳蛋白是按照包括如下步骤的方法制备获得的：
（1）将所述苹果坏死花叶病毒的外壳蛋白的编码基因克隆入原核表达载体的多克隆位点处，得到重组原核表达载体；
（2）将所述重组原核表达载体导入到作为受体的原核细胞中，得到重组原核细胞；
（3）培养所述重组原核细胞，从中获得所述苹果坏死花叶病毒的外壳蛋白。
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于：所述原核表达载体为pET28a(+)载体；作为受体的所述原核细胞为大肠杆菌BL21(DE3)。
5.根据权利要求3所述的方法，其特征在于：步骤（3）中，还包括向所述重组原核细胞的培养体系中加入IPTG至终浓度为0.5mM，37℃诱导培养2h的步骤。
6.根据权利要求3所述的方法，其特征在于：所述苹果坏死花叶病毒的外壳蛋白的编码基因为序列表中序列2所示的DNA分子。
7.利用权利要求1-6中任一所述的方法制备得到的抗苹果坏死花叶病毒的抗血清。
8.应用，为如下任一：
（C）利用权利要求3-6任一中所述的方法制备得到的苹果坏死花叶病毒的外壳蛋白和记载有权利要求1或2所述的方法的可读性载体在制备用于生产抗苹果坏死花叶病毒的抗血清或多克隆抗体的试剂盒中的应用；
（D）利用权利要求3-6任一中所述的方法制备得到的苹果坏死花叶病毒的外壳蛋白在作为免疫原制备抗苹果坏死花叶病毒的抗血清中的应用；
（E）利用权利要求1-6中任一所述的方法制备得到的抗苹果坏死花叶病毒的抗血清在检测苹果坏死花叶病毒中的应用。
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