[发明专利]一种用于表达人源铜锌超氧化物歧化酶的重组载体、重组菌株及制备方法在审
| 申请号： | 201710755941.X | 申请日： | 2017-08-29 |
| 公开（公告）号： | CN107779463A | 公开（公告）日： | 2018-03-09 |
| 发明（设计）人： | 朱艳娟;许仁杰;朱斌辉;韩蓉 | 申请（专利权）人： | 朱艳娟 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C12N1/21;C12R1/19 |
| 代理公司： | 南京经纬专利商标代理有限公司32200 | 代理人： | 孙昱 |
| 地址： | 215126 江苏省苏州市苏州工业*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 用于 表达 人源铜锌 超氧化物歧化酶 重组 载体 菌株 制备 方法 | ||
1.一种用于表达人源铜锌超氧化物歧化酶的重组载体，其特征在于，通过将SEQ ID NO.2所示的序列插入原始载体，构建而成，其中SEQ ID NO.2所示序列为在人源铜锌超氧化物歧化酶N末端添加了His-TEV标签。
2.根据权利要求1所述的用于表达人源铜锌超氧化物歧化酶的重组载体，其特征在于，原始载体为真核表达载体或原核表达载体。
3.根据权利要求2所述的用于表达人源铜锌超氧化物歧化酶的重组载体，其特征在于，原始载体为pET28a。
4.权利要求1所述的用于表达人源铜锌超氧化物歧化酶的重组载体的构建方法，其特征在于，将SEQ ID NO.2的序列以人工合成的方式插入原始载体中，构建重组载体；具体为将pET28a固定在载体上，经过脱保护、偶联、加帽、氧化等一系列化学合成过程直接把目的基因按序列顺序一个一个地连接在原始载体的多克隆位点处，构建重组载体。
5.一种重组菌株，其特征在于，通过将权利要求1所述的重组载体导入表达菌株得到。
6.根据权利要求5所述的重组菌株，其特征在于，表达菌株为大肠杆菌，优选大肠杆菌Codonplus。
7.权利要求6所述的重组菌株的制备方法，其特征在于，首先制备大肠杆菌感受态细胞，然后将重组载体转化大肠杆菌感受态细胞得到重组菌株。
8.根据权利要求7所述的重组菌株的制备方法，其特征在于，制备大肠杆菌感受态细胞为通过CaCl2化学法制备。
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