[发明专利]一种外源萝卜片段特异标记及其制备方法和应用有效
| 申请号： | 201710735768.7 | 申请日： | 2017-08-24 |
| 公开（公告）号： | CN107541517B | 公开（公告）日： | 2021-04-06 |
| 发明（设计）人： | 王同华;郭一鸣;涂金星;陈卫江;李莓;范连益;曲亮;惠荣奎 | 申请（专利权）人： | 湖南省作物研究所 |
| 主分类号： | C12N15/29 | 分类号： | C12N15/29;C12N15/10;C12Q1/6895;A01H1/02;A01H1/04 |
| 代理公司： | 长沙朕扬知识产权代理事务所(普通合伙) 43213 | 代理人： | 杨斌 |
| 地址： | 410000*** | 国省代码： | 湖南;43 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 萝卜 片段 特异 标记 及其 制备 方法 应用 | ||
【权利要求书】：
1.一种外源萝卜片段特异标记，其特征在于，所述特异标记为CLR9-1，其核苷酸序列如SEQ ID No：1所示。
2.一种如权利要求1所述的外源萝卜片段特异标记在甘蓝型油菜恢复系选育中的应用，其特征在于，该应用包括以下步骤：
1）利用甘蓝型油菜萝卜细胞质不育恢复材料CLR650为母本与甘蓝型油菜常规品系A进行杂交，获得F1群体；选择多株F1代植株与甘蓝型油菜常规品系A作为轮回亲本进行回交，构建BC1分离群体；
2）在幼苗期，利用权利要求1所述的外源萝卜片段特异标记对BC1分离群体进行分子标记辅助选择，拔除标记分析结果呈阴性的单株；在花期选择多株BC1分离群体中表型接近甘蓝型油菜常规品系A的单株作为母本，继续用甘蓝型油菜常规品系A进行回交；重复上述步骤直至获得甘蓝型油菜CLR650的BC4育性分离群体；
3）拔除BC4育性分离群体中的不育单株，将保留的可育单株全部在隔离区进行混合授粉和收获，并在盛花期调查后代群体的育性表现，直至获得可育株所占比例超过75%的群体；
4）将可育株比例超过75%的分离群体中可育株全部隔离自交，自交后代中继续选择可育株全部隔离自交，直至获得育性不分离、表型一致的甘蓝型油菜萝卜细胞质不育恢复系CLR095。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述步骤1）中甘蓝型油菜常规品系A为20B。
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