[发明专利]一种RNA circEPSTI1及其在三阴乳腺癌上的应用

权利要求书

1.一种试剂盒，其特征在于；所述检测试剂盒包括：

Trizol、三氯甲烷、异丙醇、水、逆转录缓冲液、氯化镁、三磷酸碱基脱氧核苷酸、RNA酶抑制剂、酶、circEPSTI1特异性PCR引物、β-actin特异性PCR引物、实时定量PCR缓冲液、Taq聚合酶、环状RNA逆转录引物、β-actin特异性逆转录引物；

所述水为无酶水、DEPC水或双蒸水中的一种或几种组合物，所述酶为MMLV逆转录酶或AMV酶。

2.如权利要求1所述试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括：

异丙醇100ml、三氯甲烷100ml、Trizol 50ml、DEPC水或无酶水 10ml、双蒸水10ml、5×逆转录缓冲液1ml、25mM氯化镁1ml、10mM三磷酸碱基脱氧核苷酸1ml、5U/μl RNA酶抑制剂500μl、200U/μl MMLV 逆转录酶50μl或25U/μl AMV酶50μl、0.2×实时定量 PCR缓冲液2ml、5U/μl Taq 聚合酶50μl、5μM circEPSTI1特异性PCR引物50μl、5μM β-actin特异性PCR引物30μl、10μM 环状RNA逆转录引物20μl、10μM β-actin特异性逆转录引物20μl。

3.如权利要求1或2中所述试剂盒，其特征在于：所述circEPSTI1特异性PCR引物为：

正向引物为5′-AAGCTGAAGAAGCTGAACTC- 3′

反向引物为5′-GTGTATGCACTTGTGTATTGC-3′；

所述β-actin特异性PCR引物为：

正向引物为5′-CATGTACGTTGCTATCCAGGC-3′

反向引物为5′-CTCCTTAATGTCACGCACGAT-3′。

4.如权利要求1或2中所述试剂盒，其特征在于：所述对circEPSTI1进行逆转录使用转录试剂盒和逆转录特异性引物，分别为普洛麦格Promega公司的逆转录试剂盒A3500和上海吉玛生物技术有限公司生产的逆转录特异性引物QPM010。