[发明专利]一种反式叶酸的制备方法及其应用

权利要求书

1.一种反式叶酸的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)反式叶酸粗品的合成

将对氨基苯甲酰谷氨酸、三氨基嘧啶硫酸盐、三氯丙酮溶于水中，其中基于质量比计，对氨基苯甲酰谷氨酸∶三氨基嘧啶硫酸盐∶三氯丙酮∶水＝1∶1～1.5∶1.5～3∶100～150，控制反应pH为2～7，反应温度30～80℃，保温2～10小时，过滤，滤饼用氨水溶解，过滤，滤液调节pH为1～3，过滤，得到粗品，纯度5～15％；

(2)反式叶酸的提纯

粗品用氨水溶解，过滤，滤液进半制备色谱分离，每次10ml，收集流出液，合并后减压浓缩，加纯化水稀释1～5倍，泵入半制备色谱，用质量分数为5～20％甲醇洗出，收集流出液，减压浓缩，浓缩液调pH至1～5，离心沉降，去除上层液，沉淀物经真空冷冻干燥，得到反式叶酸，其纯度95～97％；

采用LC3000高效液相色谱仪进行制备，柱子型号C1810μm 100a；半制备检测器波长为280nm，流速为20ml/min；半制备进样量每次10ml；

步骤(2)中，半制备流动相配制方法为三水合磷酸氢二钾55g，磷酸氢二钾75g，用8000ml纯化水溶解，另加900ml无水甲醇；

步骤(2)中，所述浓缩为真空浓缩，浓缩温度45℃、真空度≤-0.09MPa；所述浓缩液用纯化水稀释1～4倍后，甲醇的质量分数为10～20％；

步骤(2)中，流出液减压浓缩，浓缩液调pH至1.5～3，离心沉降，去除上层液，沉淀物经真空冷冻干燥。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，基于质量比计，对氨基苯甲酰谷氨酸∶三氨基嘧啶硫酸盐∶三氯丙酮∶水＝1∶1.2∶2∶120。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，控制反应pH为3～5，反应温度50～70℃，保温5～8小时，过滤，滤饼用氨水溶解，过滤，滤液调节pH为1.5～2.5，过滤，得到粗品。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，所述干燥为冷冻干燥，所述冷冻干燥为温度≤-30℃，真空度≤-10Pa，时间为12h。