[发明专利]无刺蜂蜂蜜多酚物质的提取及其在免疫调节中的应用

权利要求书

1.一种无刺蜂蜂蜜多酚物质的提取方法，其特征在于，包括步骤：

1)无刺蜂蜂蜜用醋酸水溶液溶解，经过搅拌和超声处理后，过滤，分离出无刺蜂蜂蜜水溶液；

步骤1)中所述醋酸水溶液的pH值为1.8～2.5,无刺蜂蜂蜜和醋酸水溶液的质量体积比为8g：20～60mL；所述超声的时间为20～40min，所述过滤的过滤介质为棉花、滤纸、滤膜中的一种；

2)将大孔树脂倒入无刺蜂蜂蜜水溶液中，搅拌吸附0.5～2h；

步骤2)中所述大孔树脂为Amberlite XAD-2大孔树脂，大孔树脂和无刺蜂蜂蜜的质量比例为1：0.5～2，所述大孔树脂首先经乙醇浸泡活化，然后用于吸附；

3)将吸附后的大孔树脂填入柱中，分别用醋酸水溶液、纯水淋洗，最后用乙醇溶液洗脱并收集洗脱液，

4)洗脱液减压真空浓缩至成为固形物，复溶于纯水，并用乙酸乙酯萃取，收集乙酸乙酯层，氮气吹干，得无刺蜂蜂蜜提取物。

2.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，步骤3)中所述醋酸水溶液的pH值为1.8～2.5,无刺蜂蜂蜜和醋酸水溶液、纯水的质量体积比为8g：10～20mL：20～30mL。

3.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，步骤3)中无刺蜂蜂蜜和无水乙醇溶液的质量体积比为8g：50～80mL；步骤4)中减压真空浓缩的温度为30～50℃。

4.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，步骤4)中水相和有机相的体积比为1：2～6。

5.根据权利要求1～4任一所述的提取方法，其特征在于，还包括对步骤4)得到的无刺蜂蜂蜜提取物进行液相色谱-串联质谱联用分离的操作，

色谱条件：采用十八烷基硅烷色谱柱，流动相为纯水-甲醇；流速0.2mL/min；进样量2μL；柱温30℃；洗脱梯度为0-2min，5％；2-10min，15％-30％；10-2 5min，30％-90％；25-30min，90％；30-31min，15％；

质谱条件：ESI源，载气温度：350℃，干燥气流速:11 L/min，雾化气压：40psig。

6.权利要求1～5任一项所述提取方法得到的无刺蜂蜂蜜提取物。

7.权利要求6所述的无刺蜂蜂蜜提取物在免疫调节中的应用。

8.权利要求6所述的无刺蜂蜂蜜提取物在制备抗炎症药物中的应用。