[发明专利]一种利用高效液相色谱从可可粉中制备表儿茶素的方法

权利要求书

1.一种利用高效液相色谱制备表儿茶素的方法，包括以下步骤：

（1）将可可粉碎至40～80目，制备成可可粉，备用；

（2）准确称取一定量的可可粉，加入8～20倍重量的30%～70%甲醇水溶液，超声提取30～60min；

（3）取上清液经0.45µm微孔滤膜过滤，滤液作为供试液；

（4）精密称取表儿茶素对照品，加入与步骤（2）相同浓度的甲醇水溶液进行超声溶解，制成表儿茶素对照品溶液；

（5）色谱条件：用十八烷基硅烷键合硅胶为填料，流动相A为乙腈，流动相B为质量百分数为0.02%～0.1%的磷酸缓冲盐溶液；采用梯度洗脱方式，其洗脱程序为：

0 min→20min，流动相A为10%→15%、流动相B为90%→85%；

20 min→30min，流动相A为15%→30%、流动相B为85%→70%；

检测波长200～215nm，流速为0.5～1.0mL/min，柱温25～40℃；

（6）液相色谱谱图的获得：精密吸取对照品溶液和供试品溶液10μL，按照设定的色谱条件，注入高效液相色谱仪，通过对照品表儿茶素的色谱峰，确定供试品溶液色谱图中的表儿茶素峰；

（7）做线性关系的考察试验，包括精密度试验、稳定性试验、重复性试验；

（8）在20.0～23.0min期间收集流动相，然后减压浓缩制得浸膏，然后冷冻干燥成粉状，即得高纯度表儿茶素。

2.根据权利要求1所述的一种利用高效液相色谱制备表儿茶素的方法，其特征在于：步骤（3）中所述微孔滤膜为0.45µm微孔滤膜。

3.根据权利要求1所述的一种利用高效液相色谱制备表儿茶素的方法，其特征在于：步骤（2）具体为，准确称取一定量的可可粉，加入10～15倍重量的50%～60%甲醇水溶液，超声提取40～50min。

4.根据权利要求1所述的一种利用高效液相色谱制备表儿茶素的方法，其特征在于：步骤（8）具体为，在20.0-23.0min期间收集流动相，然后在-0.085～-0.099MPa、25～40℃条件下减压浓缩制得浸膏，最后在-0.095～-0.099MPa、-50～-30℃条件下冷冻干燥成粉状，即得高纯度表儿茶素。