[发明专利]一种检测生物巯基化合物的体系及其检测方法有效
申请号: | 201710695090.4 | 申请日: | 2017-08-15 |
公开(公告)号: | CN107462534B | 公开(公告)日: | 2019-11-29 |
发明(设计)人: | 王丽;林晶;陈雷;孙艳涛;姜大雨 | 申请(专利权)人: | 吉林师范大学 |
主分类号: | G01N21/31 | 分类号: | G01N21/31;G01N1/38 |
代理公司: | 22204 吉林省长春市新时代专利商标代理有限公司 | 代理人: | 石岱<国际申请>=<国际公布>=<进入国 |
地址: | 136000 吉林*** | 国省代码: | 吉林;22 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 检测 生物 巯基 化合物 体系 及其 方法 | ||
1.一种检测生物巯基化合物的体系,所述生物巯基化合物是指半胱氨酸、谷胱甘肽或同型半胱氨酸,其特征在于:该体系是通过依次向1.5mL离心管中加入醋酸缓冲溶液、KI水溶液、H2O2水溶液、TMB乙醇溶液混合均匀制得;
具体步骤如下:
①、将KI溶于超纯水中,配制成浓度为10mmol·L-1的A溶液;将H2O2溶于超纯水中,配制成浓度为5mol·L-1的B溶液;将TMB溶于乙醇中,配制成浓度为1mmol·L-1的C溶液;
②、依次向1.5mL离心管中加入880μL pH=3.6的醋酸缓冲溶液,10μL的A溶液,10μL的B溶液,100μL的C溶液,混合均匀制成I--H2O2-TMB检测体系。
2.一种如权利要求1所述体系检测生物巯基化合物的方法,其特征在于:将上述制得的I--H2O2-TMB检测体系与一定体积样品检测所需浓度的生物巯基化合物溶液混合均匀后,在37℃恒温水浴锅内培养,然后进行紫外-可见吸收光谱的测量,通过ox-TMB在652nm处的吸收峰强度的变化得到检测结果,具体步骤如下:
①、用超纯水溶解生物巯基化合物,配制成浓度都是10mmol·L-1的母液,检测时再用超纯水稀释到样品检测所需的浓度,所述生物巯基化合物是指半胱氨酸、谷胱甘肽或同型半胱氨酸;
②、检测时将I--H2O2-TMB检测体系与步骤①中10μL样品检测所需浓度的一种生物巯基化合物溶液混合均匀,再在37℃恒温水浴锅内培养5min,然后对所得混合溶液进行紫外-可见吸收光谱的测量,通过ox-TMB在652nm处的吸收峰强度的变化得到检测结果。
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