[发明专利]一种无佐剂单剂量HBsAg纳米凝胶疫苗及其制备方法

权利要求书

1.一种表面带正电荷的无佐剂单剂量HBsAg纳米凝胶疫苗，其特征在于，

其制备方法步骤如下：

在搅拌条件下向壳聚糖溶液中滴入HBsAg溶液，搅拌稳定后，再滴入γ-PGA溶液，恒温搅拌，即制备得到表面带正电荷的无佐剂单剂量HBsAg纳米凝胶疫苗；

所述壳聚糖溶液的浓度为2mg/ml，pH＝6；所述HBsAg溶液的浓度为25μg/ml；所述γ-PGA溶液的浓度为0.5mg/ml；

其中，壳聚糖溶液、HBsAg溶液和γ-PGA溶液加入体积比1:1:1；

壳聚糖的分子量为100kDa-1000kDa；γ-PGA的分子量为100kDa-1000kDa；

恒温搅拌的温度为40℃，恒温搅拌的时间为20min。

2.一种如权利要求1所述的疫苗与表面带负电荷的无佐剂单剂量HBsAg纳米凝胶疫苗联用在制备乙肝疫苗中的应用，其特征在于，该乙肝疫苗具有如下作用：

1)单次免疫有利于诱导对HBV感染的长效免疫防御，长期观察中HBV-challenge后迅速清除HBV，恢复抗体水平；

2)单次免疫更有利于诱导细胞免疫应答，长期观察中HBV-challenge后具有更高的IFN-γ⁺CD8⁺T细胞与TNF-α⁺CD8⁺T细胞比例;

其中，表面带负电荷的无佐剂单剂量HBsAg纳米凝胶疫苗的制备方法步骤如下：

在搅拌条件下向γ-PGA溶液中滴入HBsAg溶液，搅拌稳定后，再滴入壳聚糖溶液，恒温搅拌，即制备得到表面带负电荷的无佐剂单剂量HBsAg纳米凝胶疫苗；

所述γ-PGA溶液的浓度为2mg/ml；所述HBsAg溶液的浓度为25μg/ml；所述壳聚糖溶液的浓度为0.5mg/ml，pH＝6；

壳聚糖溶液、HBsAg溶液和γ-PGA溶液加入体积比1:1:1；

恒温搅拌的温度为40℃，恒温搅拌的时间为20min；

壳聚糖的分子量为100kDa-1000kDa；γ-PGA的分子量为100kDa-1000kDa。