[发明专利]塞尼卡谷病毒结构蛋白抗体酶联免疫检测试剂盒

权利要求书

1.塞尼卡谷病毒结构蛋白抗原表位多肽组合物，由序列表中序列1所示的多肽、序列表中序列2所示的多肽、序列表中序列3所示的多肽和序列表中序列4所示的多肽组成。

2.根据权利要求1所述塞尼卡谷病毒结构蛋白抗原表位多肽组合物，序列1所示的多肽、序列2所示的多肽、序列3所示的多肽和序列4所示的多肽的质量比为(0.5~1.5)：(0.5~1.5)：(0.5~1.5)：(0.5~1.5)。

3.根据权利要求1所述塞尼卡谷病毒结构蛋白抗原表位多肽组合物，其特征在于：序列1所示的多肽、序列2所示的多肽、序列3所示的多肽和序列4所示的质量比为1：1：1：1。

4.一种塞尼卡谷病毒结构蛋白抗体酶联免疫检测试剂盒，包括酶联反应板、阳性对照血清、阴性对照血清和酶标二抗，其中所述酶联反应板包被有权利要求1-3中任意一项所述的塞尼卡谷病毒结构蛋白抗原表位多肽组合物。

5.根据权利要求4所述的酶联免疫检测试剂盒，其特征在于：所述酶联反应板为可拆卸96孔酶标板；所述塞尼卡谷病毒结构蛋白抗原表位多肽组合物中各个多肽为化学人工合成得到。

6.根据权利要求4所述的酶联免疫检测试剂盒，其特征在于：所述酶联反应板的获得方法是将权利要求1-3中任意一项所述塞尼卡谷病毒结构蛋白抗原表位多肽组合物溶于100μl的 pH 9.6的碳酸盐溶液，然后加到96孔聚苯乙烯酶联反应板，每孔200ng塞尼卡谷病毒结构蛋白抗原表位多肽组合物，2~8℃下放置8~12小时，使塞尼卡谷病毒结构蛋白抗原表位多肽组合物与酶联反应板充分结合，然后按照300μl/孔加入含有0.01g/ml牛血清白蛋白pH7.4的PBS缓冲液，37℃封闭处理2~3小时，甩干后，待酶联反应板干燥后4℃密封保存。

7.根据权利要求4所述的酶联免疫检测试剂盒，其特征在于：

所述阳性对照血清为塞尼卡谷病毒人工感染后采集的猪血清；所述阴性对照血清为无特定病原体的猪血清。

8.根据权利要求4所述的酶联免疫检测试剂盒，其特征在于：所述酶标二抗为辣根过氧化物酶标记兔抗猪IgG抗体。

9.根据权利要求4所述的酶联免疫检测试剂盒，其特征在于：所述试剂盒还包括底物液A、底物液B和终止液，所述底物液A为含0.0006g/ml过氧化氢尿素的柠檬酸磷酸盐缓冲液，所述底物液B为0.2mg/ml的四甲基联苯胺溶液，使用时两者以1:1的比例混合；所述终止液为2mol/L的硫酸溶液。

10.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒还包括样品稀释液和20倍浓缩洗涤液；样品稀释液为含有0.00005g/ml酪蛋白的0.01mol/L、 pH值为7.4的磷酸盐缓冲液；浓缩洗涤液为含有体积百分浓度为0.8％~1.2％的Tween-20的0.01mol/L，pH 值为7.4的磷酸盐缓冲液。