[发明专利]一种ALDH2*2基因型检测试剂盒及其检测方法

权利要求书

1.一种ALDH2*2基因型检测试剂盒，其特征在于：包括KOD DNA 聚合酶、上游引物、下游引物、特异性靶向荧光探针、GG型阳性参考品、AA型阳性参考品以及AG型阳性参考品；

所述上游引物为针对人ALDH2*2基因设计的上游引物，上游引物的序列为5’-CCCAGTCACCCTTTGGTGGCTAC-3’；

所述下游引物为针对人ALDH2*2基因设计的下游引物，下游引物的序列为5’-CGAGCCACCAGCAGACCCTCA -3’；

所述特异性靶向荧光探针是带有人ALDH2*2基因的特异性配对序列的探针，其碱基序列为5’-CTCACAGTTTTCACTTCAGTGTATGC-3’，荧光染料为氟硼二吡咯；

所述GG型阳性参考品是一种以GG纯合型DNA序列为主要成分的溶液，所述GG纯合型DNA序列是以人ALDH2*2基因1510位点GG型为模板而设计的一段线性重组DNA序列，GG纯合型DNA序列为5’- GAGCCCAGTCACCCTTTGGTGGCTACAAGATGTCGGGGAGTGGCCGGGAGTTGGGCGAGTACGGGCTGCAGGCATACACTGAAGTGAAAACTGTGAGTGTGGGACCTGCTGGGGGCTCAGGGCCTGTTGGGGCTTGAGGGCTGCTGGTGGCTCGGAGCCT-3’，其中，带有下划线的碱基位点是人ALDH2*2基因的1510位点，所述1510位点用于表征人ALDH2*2基因的GG型可突变为人ALDH2*2基因的AA型的位置；

所述AA型阳性参考品是一种以AA纯合型DNA序列为主要成分的溶液，所述AA纯合型DNA序列是以人ALDH2*2基因1510位点AA型为模板而设计的一段线性重组DNA序列，AA纯合型DNA序列为5’- GAGCCCAGTCACCCTTTGGTGGCTACAAGATGTCGGGGAGTGGCCGGGAGTTGGGCGAGTACGGGCTGCAGGCATACACTAAAGTGAAAACTGTGAGTGTGGGACCTGCTGGGGGCTCAGGGCCTGTTGGGGCTTGAGGGCTGCTGGTGGCTCGGAGCCT-3’，其中，带有下划线的碱基位点是人ALDH2*2基因的1510位点，所述1510位点用于表征人ALDH2*2基因的AA型可突变为人ALDH2*2基因的GG型的位置；

所述AG型阳性参考品是通过所述GG型阳性参考品与AA型阳性参考品按等体积混合配制而成，所述GG型阳性参考品含有的GG纯合型DNA序列的浓度等于所述AA型阳性参考品含有的AA纯合型DNA序列的浓度。

2.根据权利要求1所述的一种ALDH2*2基因型检测试剂盒，其特征在于：该ALDH2*2基因型检测试剂盒还包括阳性质控品，阳性质控品是一种以碱基序列为主要成分的试剂，所述碱基序列是通过所述GG型阳性参考品与AA型阳性参考品按等体积混合配制而成，所述阳性质控品含有GG纯合型DNA序列和AA纯合型DNA序列的浓度均为500~5000拷贝/微升。

3.根据权利要求1所述的一种ALDH2*2基因型检测试剂盒，其特征在于：所述GG型阳性参考品中含有GG纯合型DNA序列的浓度为500~5000拷贝/微升，所述AA型阳性参考品中含有AA纯合型DNA序列的浓度为500~5000拷贝/微升，所述AG型阳性参考品中含有GG纯合型DNA序列和AA纯合型DNA序列的浓度均为500~5000拷贝/微升。