[发明专利]基于重水标记的拉曼光谱快速检测牛奶中沙门氏菌的方法

权利要求书

1.一种基于重水标记的拉曼光谱快速检测牛奶中沙门氏菌的方法，其特征在于包括：将可能含有沙门氏菌的待测牛奶加入含重水的培养基进行培养，之后收集培养后的菌体细胞进行拉曼光谱扫描，并对获得的原始拉曼光谱进行分析处理，实现对待测牛奶中沙门氏菌的检测。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：若所述待测牛奶中存在沙门氏菌，则在相应原始拉曼光谱中于2040cm^-1-2300cm^-1有CD峰出现。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于包括：

(1)将一系列不同浓度的沙门氏菌种子液分别加入含重水的培养基中进行培养至对数期，之后于不同时间点分别收集菌体细胞，进行拉曼光谱扫描，对获得的拉曼光谱进行分析处理，获得CD/(CD+CH)％-原始沙门氏菌浓度的Log值标准曲线，其中，CD/(CD+CH)％为拉曼光谱中CD峰峰高与CD峰和CH峰峰高之和的比值；

(2)将可能含有沙门氏菌的待测牛奶加入含重水的培养基中进行培养至对数期，之后于不同时间点分别收集菌体细胞，进行拉曼光谱扫描，对获得的拉曼光谱进行分析处理，并与所述标准曲线对照，从而测得待测牛奶中的沙门氏菌浓度。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，步骤(2)还包括设置激光拉曼光谱仪的工作参数，所述的工作参数包括激发光的波长、激光功率和扫描时间；优选的，所述激发光的波长被设置为532nm，激光功率被设置为8mw，扫描时间被设置为10s。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述培养的温度为37℃，时间为4-8h。

6.根据权利要求1-5中任一项所述的方法，其特征在于：所述方法对于沙门氏菌的检出限为10⁴-10⁸cfu/mL。

7.根据权利要求3所述的方法，其特征在于：在所述标准曲线中CD/(CD+CH)％与原始沙门氏菌浓度的Log值呈线性关系。

8.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，步骤(2)包括：对获得的拉曼光谱进行分析处理，将所获CD/(CD+CH)％代入步骤(1)所获标准曲线，从而计算添加回收率。

9.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述含重水的培养基中重水的含量为0～100wt％，优选为50wt％。

10.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述沙门氏菌种子液的制备方法包括：将沙门氏菌置于灭菌过的超纯水培养基中进行活化，培养至对数期后期，获得所述沙门氏菌种子液。