[发明专利]一种异烟肼或其药物组合物中杂质的含量测定方法

说明书

本发明涉及一种异烟肼或其药物组合物中杂质的含量测定方法，所述方法包括以下步骤：步骤1，杂质对照品溶液的配制：精密称取异烟酸、异烟酰胺对照品适量，用水溶解并定量稀释，作为异烟酸和异烟酰胺对照品溶液；步骤2，供试品溶液的配制：取供试品适量，加水使异烟肼溶解并稀释，滤过，取续滤液作为供试品溶液；步骤3，对照溶液的配制：精密量取供试品溶液稀释100倍，作为对照溶液；步骤4，测定法：精密量取杂质对照品溶液、供试品溶液和对照溶液各10μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，根据色谱图，采用峰面积法计算异烟酸、异烟酰胺及其他杂质的含量。

技术领域：

本发明涉及一种抗结核药物异烟肼或其药物组合物中杂质含量的测定方法。

背景技术：

异烟肼与其它抗结核药联合，适用于各型结核病的治疗，包括结核性脑膜炎以及其他分枝杆菌感染。异烟肼单用适用于各型结核病的预防。

现有技术报道了应用高效液相色谱法测定异烟肼中有关物质的方法，例如以下方法，

色谱条件：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以0.02mol/L磷酸二氢钠溶液(用磷酸调pH值至6.0)-甲醇(85∶15)为流动相，检测波长262nm。理论塔板数按异烟肼峰计算应不低于4000。

供试品溶液的制备：取本品，加水溶解并稀释制成每1ml中约含0.5mg的溶液。对照溶液的制备：精密量取供试品溶液1ml，加入100ml容量瓶中，加水稀释到刻度，摇匀。分别精密吸取杂质对照品溶液、对照溶液和供试品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器于波长262nm处测定，按外标法计算已知杂质含量，按自身稀释对照法计算杂质含量。

另有文献报道了用于异烟肼含量测定的方法，十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以0.1mol/L的磷酸二氢钾溶液(10mol/L氢氧化钠调pH至6.9)，加入足够的三乙胺至三乙胺浓度为0.2mmol/L，为流动相A，甲醇为流动相B，A∶B(95∶5)，在254nm下测定。

现有技术的缺点在于，专属性不高，特别是对于异烟肼组合物中可能产生的降解产物美拉德杂质的分离。

发明内容：

本发明经过筛选得到一种新的异烟肼或其药物组合物中杂质含量的测定方法，所述方法包括以下步骤：

步骤1，杂质对照品溶液的配制：精密称取异烟酸、异烟酰胺对照品适量，用水溶解并定量，作为异烟酸和异烟酰胺对照品溶液；

步骤2，供试品溶液的配制：取供试品适量，加水使异烟肼溶解并稀释，滤过，取续滤液作为供试品溶液；

步骤3，对照溶液的配制：精密量取供试品溶液，稀释100倍，作为对照溶液；

步骤4，测定法：精密量取杂质对照品溶液、供试品溶液和对照溶液各10μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，根据色谱图，采用峰面积法计算异烟酸、异烟酰胺及其他杂质的含量。

其中，所述高效液相色谱的色谱条件如下：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.02M磷酸氢二钠溶液(磷酸调节pH至6.0-6.03)为流动相A，以甲醇为流动相B，按下表1洗脱；检测波长为262nm；流速为0.7ml/min；柱温为35℃。

表1

优选的，本发明的方法，步骤具体如下：

步骤1，杂质对照品溶液的配制：精密称取异烟酸、异烟酰胺对照品适量，用水溶解并定量稀释制成每1ml中各约含2.5μg的溶液，作为异烟酸和异烟酰胺对照品溶液；

步骤2，供试品溶液的配制：取供试品适量，加水使异烟肼溶解并稀释制成每1ml中约含异烟肼0.5mg的溶液，滤过，取续滤液作为供试品溶液；