[发明专利]一种趋化素及其衍生多肽的检测测试条及其制备方法有效
| 申请号: | 201710678761.6 | 申请日: | 2017-08-10 |
| 公开(公告)号: | CN107449920B | 公开(公告)日: | 2020-06-05 |
| 发明(设计)人: | 张键;李梦霞;陈杰;肖天霞 | 申请(专利权)人: | 深圳先进技术研究院 |
| 主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68;G01N33/558 |
| 代理公司: | 北京市诚辉律师事务所 11430 | 代理人: | 范盈 |
| 地址: | 518055 广东省深圳*** | 国省代码: | 广东;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 趋化素 及其 衍生 多肽 检测 测试 制备 方法 | ||
1.一种检测趋化素的测试条,其包括检测膜,检测膜的上游设置有含有以标记物标记的第一抗体的结合区,结合区上游设置有加样区,其中,检测膜上设置有检测区和控制区,控制区位于检测区下游;其中所述检测区上包被有第二抗体,所述控制区包被有抗第一抗体的二抗;所述第一抗体和第二抗体均能与趋化素特异性结合;
其中,结合区中包含的第一抗体选自趋化素功能性片段的抗体;趋化素功能性片段的抗体为C-23抗体;C-23的序列如SEQ ID No.1所示
CLRVQRAGEDPHSFYFPGQFAFS SEQ ID No.1;
所述检测膜选自Startorius CN95,所述检测区包被的第二抗体的用量为X±15%μg/cm,最低显色检测限为Y ng/ml,检测区包被的第二抗体的用量与最低显色检测限关系为Y=-322.23X+360.79,最低显色检测限Y选自100-300的任意数值;或者
所述检测膜选自Startorius CN140,所述检测区包被的第二抗体的用量为X±15%μg/cm,最低显色检测限为Y ng/ml,检测区包被的第二抗体的用量与最低显色检测限关系为Y=-317.51X+1628.6,最低显色检测限Y选自100-300的任意数值;或者
所述检测膜选自Pall Vivid 170,所述检测区包被的第二抗体的用量为X±15%μg/cm,最低显色检测限为Y ng/ml,检测区包被的第二抗体的用量与最低显色检测限关系为Y=-309.64X+665.17;最低显色检测限Y选自100-300的任意数值;或者
所述检测膜选自Whatman AE99,所述检测区包被的第二抗体的用量为X±15%μg/cm,最低显色检测限为Y ng/ml,检测区包被的第二抗体的用量与最低显色检测限关系为Y=-316.91X+668.99,最低显色检测限Y选自100-300的任意数值。
2.根据权利要求1所述的检测趋化素的测试条,C-23抗体为C-23单克隆抗体。
3.根据权利要求1-2任一项所述的检测趋化素的测试条,所述第二抗体选自趋化素抗体。
4.根据权利要求1-2任一项所述的检测趋化素的测试条,所述检测膜选自硝酸纤维素膜。
5.根据权利要求4所述的检测趋化素的测试条,硝酸纤维素膜粒径为5-20μm,爬速为80-250s/4cm。
6.根据权利要求4所述的检测趋化素的测试条,硝酸纤维素膜粒径为6-15μm,爬速为80-225s/4cm。
7.根据权利要求4所述的检测趋化素的测试条,硝酸纤维素膜为①Sartorius CN95,粒径为15μm,爬速为90-135s/4cm;②Sartorius CN140,粒径为8μm,爬速为110-165s/4cm;③Pall Vivid 170,粒径为6μm,爬速为150-225s/4cm或④whatman AE99,粒径为8μm,爬速为120-160s/4cm。
8.根据权利要求1-2任一项所述的检测趋化素的测试条,所述检测区包被的第二抗体的用量为0.15-5.67μg/cm。
9.根据权利要求1-2任一项所述的检测趋化素的测试条,所述检测区的第二抗体的用量、检测膜型号与最低显色检测限如表2a所示:
表2a
10.权利要求1-9任一项所述的检测趋化素的测试条的制备方法,其包括如下步骤:
(1)制备加样区,以样品垫处理液处理加样区;
(2)制备结合区:以标记物标记第一抗体,并将其涂布在结合区;
(3)制备检测膜:稀释第二抗体及第一抗体的二抗,分别包被在检测膜上,形成检测区和控制区,干燥后以封闭液进行封闭;
(4)组装测试条:依次将加样区、结合区、检测膜和吸水垫组装至底板上。
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