[发明专利]共表达PD-L1阻断剂的嵌合抗原受体修饰的免疫效应细胞

说明书

本发明涉及表达有靶向GPC3的嵌合抗原受体和PD‑L1阻断剂的免疫效应细胞。本发明还提供了包含所述免疫效应细胞的药物组合物以及利用所述免疫效应细胞或药物组合物治疗肿瘤，特别是GPC3阳性肿瘤的方法。本发明的免疫效应细胞不仅在体外对实体瘤细胞有效，在体内对实体瘤细胞也具备优异的杀伤效果。

技术领域

本发明属于免疫治疗领域。更具体地，本发明涉及共表达PD-L1阻断剂的嵌合抗原受体修饰的免疫效应细胞。

背景技术

近年来，根据CTL对靶细胞的识别特异性依赖于T淋巴细胞受体(T CellReceptor，TCR)的发现，将针对肿瘤细胞相关抗原的抗体的scFv与T淋巴细胞受体的CD3ζ或FcεRIγ等胞内信号激活基序融合成嵌合抗原受体(Chimeric antigen receptor，CAR)，并将其通过如慢病毒感染等方式基因修饰在T淋巴细胞表面。这种CAR T淋巴细胞能够以主要组织相容性复合物(Major Histocompatibility Complex，MHC)非限制性方式选择性地将T淋巴细胞定向到肿瘤细胞并特异性地杀伤肿瘤。

嵌合抗原受体包括胞外结合区，跨膜区和胞内信号区。通常胞外区包含能够识别肿瘤相关抗原的scFv，跨膜区采用CD8，CD28等分子的跨膜区，胞内信号区采用免疫受体酪氨酸活化基序(ITAM)CD3ζ或FcεRIγ及共刺激信号分子CD28、CD27、CD137、CD134等的胞内信号区。

然而，由于生物体，特别是实体瘤的微环境的复杂性，在体外表现出优良效果的候选药物，在体内往往无法表现出相应的效果。换言之，候选药物的体外结果无法合理预示体内的效果。此外，同一个抗体对具有相同靶点的不同部位的肿瘤也有不同效果。例如，曲多珠单抗在应用于HER2阳性乳腺癌时具有较好的治疗作用，但应用于HER2阳性胃癌时，却没有效果(付强,胃癌HER2信号通路及去拖住单抗临床应用进展,药品评价，2012,9(27):8-12)。

尽管免疫效应细胞在肿瘤免疫治疗中具有诱人的前景，但是其在实体瘤中的疗效仍不显著，免疫效应细胞在肿瘤组织内的存活率较差、活性不高。

因此，本领域仍然需要进行进一步的研究，以期进一步提高免疫效应细胞对于肿瘤免疫治疗的疗效，特别是开发出对实体瘤切实有效的免疫效应细胞。

发明内容

本发明的目的在于提供一种对于肿瘤免疫治疗的疗效提高的免疫效应细胞，特别是对实体瘤具备有效杀伤作用的免疫效应细胞。

在第一方面，本发明提供一种靶向GPC3的免疫效应细胞，所述免疫效应细胞表达有靶向GPC3的嵌合抗原受体和PD-L1阻断剂。

在优选的实施方式中，所述免疫效应细胞靶向阳性表达GPC3的肿瘤，包括但不限于肝癌、胃癌、肺癌、食道癌、头颈癌、膀胱癌、卵巢癌、宫颈癌、肾癌、胰腺癌、宫颈癌、脂肪肉瘤、黑色素瘤、肾上腺癌、神经鞘瘤、恶性纤维组织细胞瘤、食道癌；优选地，所述肿瘤是肝癌、胃癌、肺癌、食道癌。

在优选的实施方式中，所述免疫效应细胞是在没有细胞因子存在下，优选在没有IL2存在下，表现出优异的体外扩增性能的免疫效应细胞。

在具体的实施方式中，所述的PD-L1阻断剂为天然PD-1，或能够与PD-L1结合的突变PD-1，或能够与PD-L1结合的天然或突变PD-1的片段、或抗PD-L1的抗体。

在优选的实施方式中，所述PD-1是可溶性PD-1(sPD-1)。

在优选的实施方式中，所述抗PD-L1的抗体是单克隆抗体或多克隆抗体。

在具体的实施方式中，所述的PD-L1阻断剂为：

天然PD-1，或能够与PD-L1结合的突变PD-1，或能够与PD-L1结合的天然或突变PD-1的片段；