[发明专利]一种包载基质金属蛋白酶抑制剂的温度响应型纳米脂质体的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种纳米脂质体及其制备方法。具体涉及一种包载基质金属蛋白酶抑制剂的温度响应型纳米脂质体及其制备方法。

背景技术

侵袭和转移，是恶性肿瘤重要的生物学特性，也是癌症患者最主要的死因。肿瘤的侵袭和转移是一个复杂的过程。肿瘤细胞必须降解掉细胞外基质，才能向周围的组织侵袭并侵入血管，从而向远处的组织转移。在肿瘤微环境中，基质金属蛋白酶是一类具有锌离子依赖性的内源性蛋白水解酶，它是降解细胞外基质的主要酶类。在细胞外基质中，基质金属蛋白酶与金属蛋白酶组织抑制因子——内源性基质金属蛋白酶抑制剂保持着平衡状态，但是在肿瘤组织中，由于肿瘤组织中基质金属蛋白酶过度表达，使两者平衡被打破，金属蛋白酶组织抑制因子不足以抑制基质金属蛋白酶的活性，从而导致肿瘤细胞向周围及远处组织的侵袭和转移。因此，抑制基质金属蛋白酶的表达与活性可以发挥抗肿瘤作用。

Marimastat是一类人工合成的以异羟肟酸为母体的小分子基质金属蛋白酶抑制剂。它可以与基质金属蛋白酶的锌离子特异性结合而使酶失活。Marimastat作为广谱抑制剂，对于卵巢癌、乳腺癌、结肠癌移植瘤的生长和转移具有明显的抑制作用。但在临床试验中表现出严重的骨骼肌乏力和关节疼痛等不良反应并且具有明显剂量依赖而导致临床实验失败。

目前，随着当代材料学，细胞生物学，分子生物学的发展，纳米药物给药系统逐渐发展起来，它可以在肿瘤治疗过程中利用肿瘤组织微环境的特殊性质，将药物相对浓集于肿瘤组织部位而产生较小的副作用。近年来研究较热且安全性较高的是纳米脂质体，它是将药物包封于脂质双分子层中，通过载体被酶类分解而释放药物。但目前，药物脂质体普遍存在稳定性低，药物在循环中易渗漏的缺点。因此，具有特殊功能的靶向制剂被迫切需求。温度响应型脂质体是脂质体靶向研究领域比较热点的纳米载体之一，它同时并有效的利用了脂质体和热疗的双重优势，进一步增强了治疗的靶向性。并且正常体温下的温敏脂质体磷脂双分子层流动性差，刚性强，可以有效的把药物包裹在脂质体中而防止泄漏的发生。当温度升高至磷脂相变温度时，磷脂柔性迅速增强并发生六角形转变，而迅速将药物释放出来。因此，采用温敏脂质体载药并结合病变部位升温可以实现药物的靶向递送和在肿瘤部位的快速释放。

以Marimastat为模版药物，将其载入到温敏脂质体中形成载有基质金属蛋白酶抑制剂的温度响应型纳米脂质体，通过在肿瘤部位的局部加热，加快的血液循环能够使药物脂质体迅速聚集在肿瘤部位，并且将基质金属蛋白酶抑制剂快速的释放到肿瘤组织中，而产生抑制基质金属蛋白酶的作用，不仅提高了抗肿瘤的疗效，富集的药物脂质体还降低了其到达其他正常组织器官的概率，而减小了毒副作用，对于抗肿瘤治疗具有非常重要的意义。

发明内容

本发明提供了一种以Marimastat作为模版药物的温度响应型纳米脂质体的制备方法。目的在于提高Marimastat的靶向性，降低其毒副作用。

为达到上述目的，本发明通过以下技术方案加以实现：

本发明提供了一种以Marimastat作为模版药物的温度响应型纳米脂质体。本发明还提供了上述以Marimastat作为模板药物的温度响应型纳米脂质体的制备方法，方案如下：

本发明提供一种包载基质金属蛋白酶抑制剂的温度响应型纳米脂质体，它的主要组分以及各组分的含量为：活性药物0～1份，荧光素0～1份，主要磷脂14～20份，溶血磷脂0～2份，聚乙二醇材料0～1份。

所述的主要磷脂包括二棕榈酰磷脂酰胆碱(DPPC)，二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱(DMPC)，二硬脂酰磷脂酰胆碱(DSPC)中的一种，本发明优选二棕榈酰磷脂酰胆碱。溶血磷脂包括硬脂酰溶血卵磷脂(S-lysoPC)，肉豆蔻酰溶血卵磷脂(M-lysoPC)，棕榈酰溶血卵磷脂(P-lysoPC)中的一种。本发明优选硬脂酰溶血卵磷脂。本发明必须包括主要磷脂，因其具有温度敏感性，是本发明温度响应型纳米脂质体的关键材料。

其中，溶血磷脂的含量与温度响应型纳米脂质体的相变温度与稳定性有关，溶血磷脂含量太低，则脂质体的相变温度太高，溶血磷脂含量太高，则会造成脂质体结构的不稳定，导致突释的发生。

所述的聚乙二醇材料为磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇(DSPE-PEG)，其分子量为2000。

所述的活性药物包括Batimastat，Marimastat，Tanomastat，Prinomastat中的一种，本发明优选Marimastat作为模板药物。

所述的荧光素为羧基荧光素，用于对温度响应型纳米脂质体的温度敏感性考察。