[发明专利]用于扩增cfDNA样品中多个目标的NGS建库引物池及应用有效
| 申请号: | 201710657832.4 | 申请日: | 2017-08-03 |
| 公开(公告)号: | CN107254541B | 公开(公告)日: | 2020-05-08 |
| 发明(设计)人: | 陈梦麟;黄凯铃;骆颖筠 | 申请(专利权)人: | 广州万德基因医学科技有限公司 |
| 主分类号: | C12Q1/6848 | 分类号: | C12Q1/6848;C12N15/11 |
| 代理公司: | 广州嘉权专利商标事务所有限公司 44205 | 代理人: | 许飞 |
| 地址: | 510535 广东省广州市高新*** | 国省代码: | 广东;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 用于 扩增 cfdna 样品 中多个 目标 ngs 引物 应用 | ||
1.用于扩增cfDNA样品中多个目标的引物池的设计方法,引物池中的引物由通用引物段和特异性引物段组成,通用引物段连接在特异性引物的5’端,至少一条引物的通用引物段和特异性引物段之间连接有调整引物Tm的
所述特异性引物段的碱基个数为24~35,特异性引物段的解链温度为62~70℃,特异性引物段的GC含量为50~60%;
所述引物池中引物的结构通式为:
CAPl:通用引物+
CAP2:通用引物+特异性引物;
通用引物段的序列与目的基因不同源。
2.根据权利要求1所述的设计方法,其特征在于:引物池中的引物的通用引物段为:
GSPL:CTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATCT
GSP2:GGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATCT。
3.根据权利要求1所述的设计方法,其特征在于:引物的Tm值基于Santa Lucia热力学参数表的最邻近法计算得到。
4.一种用于扩增cfDNA样品的多重PCR试剂盒,其特征在于:多重PCR试剂盒使用的引物池使用权利要求1~3任一项所述的设计方法设计得到。
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