[发明专利]用于扩增cfDNA样品中多个目标的NGS建库引物池及应用有效

专利信息
申请号: 201710657832.4 申请日: 2017-08-03
公开(公告)号: CN107254541B 公开(公告)日: 2020-05-08
发明(设计)人: 陈梦麟;黄凯铃;骆颖筠 申请(专利权)人: 广州万德基因医学科技有限公司
主分类号: C12Q1/6848 分类号: C12Q1/6848;C12N15/11
代理公司: 广州嘉权专利商标事务所有限公司 44205 代理人: 许飞
地址: 510535 广东省广州市高新*** 国省代码: 广东;44
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摘要:
搜索关键词: 用于 扩增 cfdna 样品 中多个 目标 ngs 引物 应用
【权利要求书】:

1.用于扩增cfDNA样品中多个目标的引物池的设计方法,引物池中的引物由通用引物段和特异性引物段组成,通用引物段连接在特异性引物的5’端,至少一条引物的通用引物段和特异性引物段之间连接有调整引物Tm的(N)k序列,各引物的Tm值之间的差值不超过10℃;

所述特异性引物段的碱基个数为24~35,特异性引物段的解链温度为62~70℃,特异性引物段的GC含量为50~60%;

所述引物池中引物的结构通式为:

CAPl:通用引物+(N)k +特异性引物,k为1~15之间的整数;

CAP2:通用引物+特异性引物;

通用引物段的序列与目的基因不同源。

2.根据权利要求1所述的设计方法,其特征在于:引物池中的引物的通用引物段为:

GSPL:CTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATCT

GSP2:GGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATCT。

3.根据权利要求1所述的设计方法,其特征在于:引物的Tm值基于Santa Lucia热力学参数表的最邻近法计算得到。

4.一种用于扩增cfDNA样品的多重PCR试剂盒,其特征在于:多重PCR试剂盒使用的引物池使用权利要求1~3任一项所述的设计方法设计得到。

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