[发明专利]一种基于负载Rh@Pd纳米枝晶的磺化碳纳米管的免疫传感器的制备方法及应用

说明书

本发明属于免疫分析和生物传感技术领域，提供了一种基于负载Rh@Pd纳米枝晶的磺化碳纳米管的免疫传感器的制备方法及应用。具体是采用负载Rh@Pd纳米枝晶的磺化碳纳米管作为基底材料，实现了宫颈癌肿瘤标志物CEA、CA125、SCCA的检测，具有特异性强，灵敏度高，检测限低，对宫颈癌的早期检测具有重要的科学意义和应用价值。

技术领域

本发明属于免疫分析和生物传感技术领域，提供了一种基于负载Rh@Pd纳米枝晶的磺化碳纳米管的免疫传感器的制备方法及应用。

背景技术

目前宫颈癌已经成为危害女性健康的重要因素。宫颈癌肿瘤标志物的灵敏检测，在临床上对于肿瘤的早期发现，肿瘤高危人群的筛选、良性和恶性肿瘤的鉴别诊断、肿瘤发展程度的判断，肿瘤的治疗效果的观察和评价及肿瘤复发和预后的预测产生极大的影响，引起人们的广泛关注。

目前电化学免疫传感器已经广泛用于宫颈癌及各种肿瘤标志物的检测，一般可分为有标记和无标记两种，其中无标记型电化学免疫传感器结合了高特异性的免疫分析技术和高灵敏的电化学分析技术，具有灵敏度高、制备简单、检测快速、成本低等优点，在临床检验、环境监测、食品安全控制、生物监测等领域都有重要的应用价值。

本发明成功构建了一种基于负载Rh@Pd纳米枝晶的磺化碳纳米管的无标记型免疫传感器，Rh@Pd双金属为纳米枝晶状，具有良好的水溶性和催化性能，具有更多的结合位点，能有效吸附并固载抗体。磺酸功能化的多壁碳纳米管具有优异的导电性，大的比表面积，良好的稳定性和生物相容性。二者通过物理静电吸附作用相互结合，由于二者的协同作用有助于提高材料的电化学性质，能够更好的对测定信号实现放大，提高肿瘤标志物检测的灵敏度。

发明内容

本发明提供了一种基于负载Rh@Pd纳米枝晶的磺化碳纳米管的免疫传感器的制备方法及应用，实现了对宫颈癌标志物的灵敏检测。

本发明的目的之一是提供一种基于负载Rh@Pd纳米枝晶的磺化碳纳米管的免疫传感器的制备方法。

本发明的目的之二是将所制备的基于负载Rh@Pd纳米枝晶的磺化碳纳米管的免疫传感器应用于宫颈癌癌标志物的高灵敏、特异性检测。

本发明的技术方案，包括以下步骤。

1. 一种基于负载Rh@Pd纳米枝晶的磺化碳纳米管的免疫传感器的制备方法，步骤如下：

（1）将直径为3 ~ 5 mm的玻碳电极用Al₂O₃抛光粉打磨，超纯水清洗干净；

（2）取6 µL、1.0 ~ 3.0 mg/mL的负载Rh@Pd纳米枝晶的磺化碳纳米管分散液滴涂到电极表面，室温下晾干，超纯水冲洗电极表面，晾干；

（3）继续将6 µL、8 ~ 10 µg/mL的肿瘤标志物捕获抗体Ab₁滴加到电极表面，超纯水冲洗，4 °C冰箱中干燥；

（4）继续将4 µL、0.8 ~ 1.2 mg/mL的牛血清白蛋白BSA溶液滴加到电极表面，超纯水冲洗电极表面，4 °C冰箱中晾干；

（5）滴加6 µL、25 fg/mL ~ 100 ng/mL的一系列不同浓度的肿瘤标志物抗原Ag溶液，超纯水冲洗电极表面，4 °C冰箱中晾干，制得一种基于负载Rh@Pd纳米枝晶的磺化碳纳米管的免疫传感器。

2.所述Rh@Pd纳米枝晶的制备，步骤如下：