[发明专利]产琼胶降解酶的芽孢杆菌Bacillussp.W2017及其应用在审
| 申请号： | 201710651804.1 | 申请日： | 2017-08-02 |
| 公开（公告）号： | CN107739721A | 公开（公告）日： | 2018-02-27 |
| 发明（设计）人： | 李莉莉;秦松;武敏;刘正一;焦绪栋;崔玉琳 | 申请（专利权）人： | 中国科学院烟台海岸带研究所 |
| 主分类号： | C12N1/20 | 分类号： | C12N1/20;C12N9/38;C12N9/40;C12P19/04;C12R1/07 |
| 代理公司： | 深圳市科进知识产权代理事务所(普通合伙)44316 | 代理人： | 赵勍毅 |
| 地址： | 264003 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 产琼胶 降解 芽孢 杆菌 bacillussp w2017 及其 应用 | ||
1.一种芽孢杆菌Bacillus sp.W2017，其特征在于，所述芽孢杆菌Bacillus sp.W2017保存于中国典型培养物保藏中心，地址：中国湖北省武汉市，洪山区八一路，武汉大学，邮政编码：430072，保藏编号CCTCC No：M 2017226，保藏日期：2017年05月02日。
2.一种采用权利要求1所述的芽孢杆菌Bacillus sp.W2017制备琼胶降解酶的方法，其特征在于，包括：
将所述芽孢杆菌Bacillus sp.W2017活化后得到菌液，将所述菌液涂布到固体培养基上；
将所述固体培养基上的芽孢杆菌Bacillus sp.W2017接种于发酵产酶培养基中；
在温度为25-35℃条件下，将所述发酵产酶培养基置于转速为150-230r/min的摇床上培养12-16h至对数期，得到菌株的种子液；
将所述种子液接种于发酵产酶培养基中，并在温度为25-35℃，转速为150-230r/min的摇床上培养24-48h，得到发酵液；
将所述发酵液在8000-12000r/min下离心5-20min，收集上清液，即得到琼胶降解酶。
3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，在所述将所述种子液接种于发酵产酶培养基中，所述种子液的接种量为5％-15％。
4.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述固体培养基包括2.0-5.0g/L的胰蛋白胨、l.0-5.0g/L的酵母浸粉、0.01-0.1g/L的柠檬酸铁和15.0-20.0g/L的琼胶及海水。
5.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述发酵产酶培养基包括l.0-5.0g/L的酵母浸粉、3.0-7.0g/L的蛋白胨、1.0-5.0g/L的牛肉膏、0.01-0.1g/L的磷酸铁、0.07-0.15g/L的琼胶及合成海水。
6.一种易溶琼胶的制备方法，其特征在于，将权利要求2-5任意一项权利要求所述的琼胶降解酶加入含有质量体积比0.2-1.0％的琼胶底物中，在温度为30-45℃条件下，150-200r/min的摇床上酶解12-24h，即可制备易溶琼胶。
7.如权利要求1所述的芽孢杆菌Bacillus sp.W2017在制备琼胶降解酶、降解琼胶制备琼胶寡糖的应用。
8.一种用于筛选权利要求1所述的Bacillus sp.W2017发酵产琼胶降解酶的培养基，其特征在于，所述培养基中的碳源包含有琼胶。
9.如权利要求8所述的培养基，其特征在于，所述琼胶从红藻中提取。
10.如权利要求8所述的培养基，其特征在于，所述培养基中添加有金属离子，所述金属离子的添加质量体积百分比为0.2％-1％。
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