[发明专利]一种细胞或溶液中生物分子的捕获方法

说明书

本发明公开了一种细胞或生物分子的捕获方法。该方法包括如下步骤：（I）使含有目标细胞或生物分子的介质进入包括用于捕获所述目标细胞或生物分子的捕获机构的装置中；（II）使介质流经捕获机构，以使目标细胞或生物分子结合至所述捕获结构上；（III）去除没有特异性地结合至所述捕获机构上的不需要的未结合的杂物、细胞或分子；（IV）使目标细胞或生物分子自所述捕获机构脱离；以及（V）收集目标细胞或生物分子。所述捕获机构包括一个或多个层叠的捕获筛，所述捕获筛包括网状基体及形成于所述网状基体上的捕获层，所述捕获层含有能够与所述目标细胞或生物分子特异性结合的捕获物。本发明的方法具有高特异性和高通量，并适于由被细胞表达的分子捕获细胞或捕获溶液中的生物分子，特别适于捕获和分选循环肿瘤细胞。

技术领域

本发明涉及用于通过由细胞表达的生物分子来捕获细胞或捕获溶液中生物分子的装置，特别涉及一种用于通过由目标细胞表达的生物分子来捕获目标细胞（如，循环肿瘤细胞）或捕获溶液中目标生物分子的捕获筛以及具有这种捕获筛的装置。

背景技术

循环肿瘤细胞即血液循环的肿瘤细胞，被认为和肿瘤的远端转移等问题有重大关系。一般癌症患者的10ml血液中仅有1-10个循环肿瘤细胞，其捕获速度慢或特异性差是快速检测病人血样迫切需要解决的难题。

现在的分选方法如传统的免疫磁珠分选法重复性好、灵敏度高、特异性好、可以定量分析循环肿瘤细胞，但是操作速度慢、通量小。膜微孔过滤技术和梯度密度离心法虽然操作简单，分离后细胞活性较好，但特异性低和假阳性率高。微流控技术操作简单、所需抗体量少，但成本较高、假阴性率高。并且微流控技术公司现在主要针对科研客户，需要提前混合多种试剂，过于依赖老式芯片，产业化困难，因此进入体外诊断领域困难。其他的如美国的Cell Search系统灵敏度高、特异性高，但耗血量大、所需抗体量大、成本高，无法实现活细胞捕获，无法对循环肿瘤细胞进行收集再培养，因此只能做DNA测序却不能做RNA测序，不能作为用药指导。

发明内容

本发明的目的是提供一种用于捕获细胞或溶液中生物分子的方法，其具有高特异性和高通量，并适于由被细胞表达的分子捕获细胞或捕获溶液中的生物分子，特别适于捕获和分选循环肿瘤细胞。

为达到上述目的，本发明采用的技术方案为：

一种细胞或溶液中生物分子的捕获方法，包括如下步骤：

（I）使含有目标细胞或生物分子的介质进入包括用于捕获所述目标细胞或生物分子的捕获机构的装置中；

（II）使所述介质流经所述捕获机构，以使所述目标细胞或生物分子结合至所述捕获结构上；

（III）去除没有特异性地结合至所述捕获机构上的不需要的未结合的杂物、细胞或分子；

（IV）使所述目标细胞或生物分子自所述捕获机构脱离；以及

（V）收集所述目标细胞或生物分子；

其中，所述捕获机构包括至少一个捕获筛，所述捕获筛包括网状基体及形成于所述网状基体上的捕获层，所述捕获层含有能够与所述目标细胞或生物分子特异性结合的捕获物。该方法采用一种含有一个或者多个层叠的多孔捕获筛，基于筛网表面的分子特异性识别与筛网的物理空间效应，捕获目标细胞或生物分子。

优选地，步骤（I）中，所述介质通过注射或泵流入所述装置。

优选地，步骤（II）中，使所述介质在流出所述装置之前多次流经所述捕获机构。

更优选地，所述注射或泵的操作方向是可转换的，所述介质先正向流经所述捕获机构，之后再反向流经所述捕获机构。

优选地，步骤（III）中，用纯水或其他温和溶剂冲洗所述捕获机构以去除所述未结合的杂物、细胞或分子。